一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。
原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。

兔环磷酸腺苷(cAMP)elisa试剂盒Rabbit cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit96T/48T

兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒Rabbit von Willebrand Factor,VWF ELISA Kit96T/48T

兔血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 Rabbit Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit96T/48T

兔骨桥素(OPN)ELISA试剂盒Rabbit Osteopontin,OPN ELISA Kit 96T/48T

兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒Rabbit lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit96T/48T

兔血清总补体(CH50)ELISA试剂盒Rabbit 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit96T/48T

兔乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒Rabbit acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 96T/48T

兔诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒Rabbit inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit 96T/48T

兔热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒Rabbit Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit96T/48T

兔热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒Rabbit Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit96T/48T

兔热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒Rabbit Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit96T/48T

兔热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒Rabbit Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit96T/48T

兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒Rabbit amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit96T/48T

兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒Rabbit Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit96T/48T

兔白介素17(IL-17)ELISA试剂盒Rabbit Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit96T/48T

兔乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒Rabbit acetylcholine,ACH ELISA Kit96T/48T

兔去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒Rabbit Noradrenaline,NA ELISA Kit96T/48T

兔子生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒Rabbit Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T

兔子α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 Rabbit Interferon α,IFN-α ELISA Kit 96T/48T

一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒 Rabbit E-Selectin ELISA Kit 96T/48T

兔子视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒Rabbit Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit 96T/48T

兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA试剂盒Rabbit major histocompatibility complex Ⅲ,MHCⅢ/RLAⅢ ELISA Kit 96T/48T

兔淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒Rabbit lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 96T/48T

兔儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒Rabbit catecholamine,CA ELISA Kit 96T/48T

兔吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒Rabbit pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA Kit 96T/48T

兔糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒Rabbit Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 96T/48T

兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒Rabbit Cystatin C,Cys-C ELISA Kit 96T/48T

兔子脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit 96T/48T

兔子组织因子(TF)ELISA试剂盒rabbit Tissue factor,TF ELISA Kit96T/48T

兔子骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒Rabbit Crosslaps,Cr ELISA Kit 96T/48T

兔子组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒rabbit Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA Kit 96T/48T

兔子组胺(HIS)ELISA试剂盒rabbit Histamine,HIS ELISA Kit96T/48T

兔子转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒rabbit Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit96T/48T

兔子肿瘤坏死因子α(TNF-α) ELISA试剂盒 rabbit Tumor necrosis factor α,TNFα ELISA Kit 96T/48T

兔子脂联素(ADP)ELISA试剂盒rabbit adiponectin,ADP ELISA Kit96T/48T

兔肾素(Renin)ELISA试剂盒Rabbit Renin ELISA Kit 96T/48T

兔子胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒rabbit Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit 96T/48T

兔子胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒rabbit Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit 96T/48T

兔子胰岛素(INS)ELISA试剂盒rabbit Insulin,INS ELISA Kit 96T/48T

兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒Rabbit oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 96T/48T

兔子补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒Rabbit Complement 4,C4 ELISA Kit 96T/48T

兔子血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒rabbit platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 96T/48T

兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒Rabbit Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit 96T/48T

兔子血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒rabbit platelet activating factor,PAF ELISA Kit 96T/48T

兔子血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒 rabbit thrombomodulin,TM ELISA Kit 96T/48T

兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒rabbit Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 96T/48T

兔子纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒rabbit plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit 96T/48T

兔子纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒rabbit plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit 96T/48T

兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒rabbit intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit 96T/48T

兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒Rabbit Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit 96T/48T

兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒rabbit intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit96T/48T

兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒rabbit intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54 ELISA Kit 96T/48T

兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒rabbit Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T

兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒rabbit Leptin,LEP ELISA Kit 96T/48T

兔子神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒rabbit neurotrophin 4,NT-4 ELISA Kit 96T/48T

兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒rabbit neurotrophin 3,NT-3 ELISA Kit 96T/48T

兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒rabbit Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit96T/48T

兔子神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒rabbit Nerve growth factor,NGF ELISA Kit96T/48T