一站式 CTAB-PAGE 电泳套装30 次二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。
原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
一站式 CTAB-PAGE 电泳套装30 次特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。

大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa试剂盒Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit96T/48T

大鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA试剂盒Rat major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ ELISA Kit 96T/48T

大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA试剂盒Rat major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ ELISA Kit 96T/48T

大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒Rat Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit 96T/48T

大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit96T/48T

大鼠胰高血糖素样肽1(Glp-1)ELISA试剂盒Rat ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit96T/48T

大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒Rat Cholecystokinin,CCK ELISA Kit96T/48T

大鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒Rat brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISA Kit 96T/48T

大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒Rat 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit96T/48T

大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒Rat apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit96T/48T

大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒Rat apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit96T/48T

大鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit96T/48T

大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒Rat N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit96T/48T

大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒Rat Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit96T/48T

大鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒Rat Vitamin C,VC ELISA Kit96T/48T

大鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒Rat Vitamin B6,VB6 ELISA Kit96T/48T

大鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒Rat Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit 96T/48T

大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒Rat Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit96T/48T

大鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒Rat soluble P-selectin,sP-selectin ELISA Kit96T/48T

大鼠S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒Rat Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit96T/48T

大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒Rat Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit96T/48T

大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒Rat Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 96T/48T

大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒Rat Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit 96T/48T

大鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒Rat Myoglobin,MYO/MB ELISA Kit96T/48T

大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit96T/48T

大鼠乙酰胆碱(Ach)ELISA试剂盒Rat acetylcholine,ACH ELISA Kit96T/48T

大鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒Rat thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA Kit96T/48T

大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒Rat Anti-thyroid-globulin antibody,ATGA/TGAB ELISA Kit96T/48T

大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒Rat corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit96T/48T

大鼠促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit96T/48T

大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒Rat Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit96T/48T

大鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒Rat leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 96T/48T

大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒Rat Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 96T/48T

大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒Rat intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit96T/48T

大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒Rat telomerase,TE ELISA Kit 96T/48T

大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒Rat matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit 96T/48T

大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒Rat matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit 96T/48T

大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒Rat matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit 96T/48T

大鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit96T/48T

大鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)ELISA试剂盒Rat basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit 96T/48T

大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒Rat macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit96T/48T

大鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒Rat Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1,sICAM-1 ELISA Kit 96T/48T

大鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒Rat soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit96T/48T

大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒Rat Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 96T/48T

大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒Rat Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T

一站式 CTAB-PAGE 电泳套装30 次大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒Rat Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 96T/48T

大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒Rat Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 96T/48T

大鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒Rat Endostatin,ES ELISA Kit96T/48T

大鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒Rat brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit96T/48T

大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒Rat Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit96T/48T

大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒Rat Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit96T/48T

大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒Rat intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit96T/48T

大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒Rat intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit96T/48T

大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 Rat plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit 96T/48T

大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒Rat plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit 96T/48T

大鼠血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒Rat Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 96T/48T

大鼠血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒Rat thrombomodulin,TM ELISA Kit96T/48T

大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒Rat platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 96T/48T