食管癌组织细胞使用说明书【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
产品名称:食管癌组织细胞使用说明书
规格:5×106
运输方式:干冰或者活体细胞运输,保证细胞运输中的存活率。
特点:细胞代数为4-5代左右。
包装:内层无菌自封袋、专用防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。
这是一株高转移肺癌细胞。
细胞特性:
来源:肺癌
形态:上皮细胞样
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
食管癌组织细胞使用说明书操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
食管癌组织细胞使用说明书注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
食管癌组织细胞使用说明书温馨提示:
1)公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代,不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
2)公司细胞资源中心承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件,中心不保证其准确性。
3)从文献等处引用的信息本中心未进行核实,仅供参考。
4)使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规,充分考虑可能存在的风险和责任,采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
ALDH3A1英文名称:乙醛脱氢酶家族3成员A1抗体 0.1ml
phospho-alpha B Crystallin (Ser59)英文名称:磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体 0.1ml
ACTG2英文名称:γ2肌动蛋白抗体 0.2ml
AES英文名称:gp130结合蛋白GAM抗体 0.2ml
AMHR2英文名称:缪勒激素2型受体抗体 0.1ml
ACTR1英文名称:激活素受体1A抗体 0.2ml
ACTR2英文名称:激活素受体2A抗体 0.2ml
Activin Receptor Type IIB英文名称:激活素受体2B抗体 0.2ml
C2orf88 英文名称:2号染色体开放阅读框88抗体 0.2ml
ARHGEF18英文名称:G蛋白偶联受体ARHGEF18抗体 0.2ml
Activin A Receptor Type IB英文名称:激活素受体1B抗体 0.2ml
ARA24英文名称:雄激素受体相关蛋白24抗体 0.2ml
Amyloid Precursor Protein英文名称:淀粉样肽前体蛋白抗体(C端) 0.1ml
ADCY2英文名称:腺苷酸环化酶2抗体 0.2ml
APOC3英文名称:载脂蛋白C3抗体 0.2ml
Apolipoprotein E4英文名称:载脂蛋白E4抗体 0.2ml
AMBRA1英文名称:自噬相关基因AMBRA1抗体 0.2ml
Phospho-ATG4C(Ser177)英文名称:磷酸化自噬相关蛋白4C抗体 0.1ml
Phospho-ATG4C(Ser398)英文名称:磷酸化自噬相关蛋白4C抗体 0.1ml
phospho-ASK1 (Ser966)英文名称:磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体 0.1ml
phospho-ATXN1 (Ser775)英文名称:磷酸化失调症蛋白1抗体 0.1ml
1,3,5-三咖啡酰奎宁酸1,3,5-tricaffeoylquinic acid1073897-80-9≥ 98%10mg/支
大豆皂苷Aasoyasaponin Aa117230-33-8≥ 98%10mg/支
大豆皂苷Be甲酯soyasaponin Be methyl ester补充中≥98%5mg/支
大豆皂苷Besoyasaponin Be补充中≥98%5mg/支
大豆皂苷Bdsoyasaponin Bd补充中≥98%5mg/支
格兰地新groenlandicine38691-95-1≥98%10mg/支
花柏醛chamigrenal19912-84-6≥98%10mg/支
β-花柏烯酸β-chamigrenic acid补充中≥98%10mg/支
戈米辛GGomisin G62956-48-3≥98%10mg/支
2'-乙酰毛蕊花糖苷2‘-acetylacteoside94492-24-7HPLC≥98%10mg/支
管花苷ATubuloside A112516-05-9≥ 98%20mg/支
戈米辛JGomisin J66280-25-9HPLC≥98%20mg/支
β-榄香酮酸β-demonic acid28282-25-9≥98%20mg/支
藜芦胺Veratramine60-70-8≥98%20mg/支
介芬胺Jervine460-59-0≥98%20mg/支
佛司可林Forskolin66575-29-9HPLC≥97%20mg/支
食管癌组织细胞使用说明书知母皂苷Ctimsaponin C185432-00-2HPLC≥97%10mg/支
Artemisinine63968-64-9≥ 98%20 mg/支
非洲防己碱columbamine3621-36-1≥ 98%20 mg/支
绞股蓝皂苷Agypenoside A157752-01-7≥ 98%20 mg/支
蝶豆素clitorin55804-74-5≥ 98%10mg/支
异东莨菪内酯isoscopoletin补充中≥98%10mg/支
东莨菪内酯Scopoletin92-61-5≥98%20mg/支
3-O-{2-O-[6-O-(对羟基-反-香豆酰)-葡萄糖基]-鼠李糖基}槲皮素Quercetin-3-O-[2-O-(6-O-p-hydroxyl-E-coumaroyl)-D-glucosyl]-(1-2)-L-rhamnoside补充中≥98%10mg/支
槲皮素 3-O-葡萄糖基 (1→2)鼠李糖苷Quercetin-3-O-D-glucosyl]-(1-2)-L-rhamnoside补充中≥98%10mg/支