规格:5×106
运输方式:干冰或者活体细胞运输,保证细胞运输中的存活率。
特点:细胞代数为4-5代左右。
包装:内层无菌自封袋、专用防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。
细胞介绍
该细胞系源自于一名19岁车祸罹难的健康男性的视网膜组织,由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。该细胞系表达视网膜色素细胞特有的分子标记如胞内视黄醛结合蛋白和PRE-65。
细胞特性
1)来源:视网膜
2)形态:上皮细胞样
3)含量:>1x106 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM/F12培养基(DMEM/F12,GIBCO,货号10565-042);胎牛血清,10%;双抗1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
下面以T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至*终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
人视网膜上皮细胞上海直销操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体90.2ml
NR1/NMDAR1/GLUR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)人低密度脂蛋白0.2ml
NR1D1人低密度脂蛋白免疫复合物0.2ml
NR1H4人低密度脂蛋白受体0.2ml
NR2A (Glutamate receptor2A)人低密度脂蛋白受体相关蛋白60.2ml
NR2B (Glutamate receptor)人低氧诱导因子1α0.2ml
NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C)人抵抗素0.2ml
NR2C2人第八因子相关抗原0.1ml
NR2D人电子转移黄素蛋白β肽0.2ml
NR2E1人淀粉样前体蛋白0.2ml
NR2E3人凋亡蛋白酶激活因子10.2ml
NR2F2人凋亡相关半胱氨酸肽酶40.1ml
NR3B人凋亡相关因子0.2ml
NR5A2/LRH1人凋亡相关因子配体0.2ml
NRARP人凋亡信号调节激酶I0.2ml
NRAS人凋亡诱导因子0.2ml
N-ras人叠氮胸苷0.2ml
NRF-1人丁型肝炎IgG0.2ml
NRF-1(nuclear respiratory factor-1)人丁型肝炎IgM0.2ml
Nrf2人毒性休克综合征毒素10.2ml
Nrf2 peptide人毒蕈碱型乙酰胆碱受体0.2ml
人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(anti-MCV Ab)免疫试剂盒Human POT1 ELISA kit
人抗突触前膜抗体(PsmAb)免疫试剂盒Human muscarinic acetylcholine receptor M2(mAChRM2)autoantibody ELISA kit
人视网膜上皮细胞上海直销人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)免疫试剂盒Human DYNLL1 ELISA kit
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)免疫试剂盒Human hepatitis D virus antibody,HDV antibody ELISA Kit
人抗外切酶体成分10(EXOSC10)抗体免疫试剂盒Human hepatitis D virus(HDV) antigen ELISA Kit
人抗外切酶体复合物成分RRP45(EXOSC9)抗体免疫试剂盒Human Hepatitis D virus IgM,HDV IgM ELISA Kit
人抗网硬蛋白抗体(ARA)免疫试剂盒human Hepatitis D virus IgG,HDV IgG ELISA Kit
人抗尾状核(CN)自身抗体免疫试剂盒Human Cholinesterase,BCHE ELISA kit
人抗胃壁细胞抗体(AGPA/PCA)免疫试剂盒human Azidothymidine,AZT ELISA Kit
人抗纹状体(ST)自身抗体免疫试剂盒Human Calponin-1,CNN1 ELISA Kit
人抗线粒体抗体(AMA)免疫试剂盒Human BIRC4 ELISA kit
人抗线粒体抗体M2亚型(AMA-M2)免疫试剂盒Human DAPK ELISA Kit
人抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗体免疫试剂盒human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA Kit
人抗小脑(CE)自身抗体免疫试剂盒Human apoptosis protease activating factor-1,Apaf-1 ELISA Kit
人抗小鼠抗体(HAMA)免疫试剂盒Human FE65 ELISA kit
人抗心肌β1受体(MB1R)自身抗体免疫试剂盒Human ETFDH ELISA kit
人抗心肌抗体(AMA)免疫试剂盒Human ETFB ELISA Kit
人抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)免疫试剂盒Human voltage-gated potassium channel antibody,VGKC-ab ELISA Kit
人抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)免疫试剂盒Human voltage-gated potassium channel,VGKC ELISA Kit
人抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)免疫试剂盒Human Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA Kit