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详细内容
产品名称：小鼠成纤维细胞使用说明书
规格：5×105
保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存
储存：液氮。
运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
免费运输，保证运输中细胞的正常生长，关于其价格、报价、货期，请咨询我们。
产品特点：活性好、存活率高、实验成果特征明显
细胞特性
1）来源：组织：皮下结缔组织；疏松结缔组织及脂肪 品系：C3H/An
2）形态：成纤维细胞
3）含量：>1x106 个/mL
4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM,GIBCO,货号C11095500BT，添加NaHCO3 1.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：3比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为类；
1，细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2，4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10E6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
小鼠成纤维细胞使用说明书注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
小鼠成纤维细胞使用说明书特点：
1) 特异性强：只对肿瘤细胞进行有效识别和杀灭，而不伤害正常组织和细胞；抗瘤谱广。
2) 对体内各种肿瘤细胞均能有效治疗。
3) 安全性好，除可能出现的发热、少量出血外，无其他不良反应。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
公司所售细胞均为原代细胞、传代细胞，细胞系。细胞经过严格的控制（从组织来源、实验室条件等方面），产品名称纯度可达98％。不同的细胞传代次数不一。多数细胞种类是从胚胎提取，于原代（或二代）冻存在液氮中。细胞采用干冰运输，客户收到细胞后，从干冰中取出放入液氮中保存，待实验安排好后，解冻后即可以进行复苏培养。公司实验室的细胞、培养基都是经过严格检验，分离、配制而成，产品质量过硬。
phospho-EIF4EBP1(Ser111)溶血磷脂酸酰基转移酶D抗体0.1ml
phospho-eIF4EBP1+2+3 (Thr45)溶血磷脂酸酰基转移酶β抗体0.1ml
phospho-eIF4G (ser1185)溶血磷脂酰基转移酶5抗体0.1ml
phospho-EIF4G1 (Ser1238)溶血磷脂酰基转移酶抗体0.5ml
Phospho-ELk1 (Ser383)溶质携带物家族-1(抗原)0.1ml
Phospho-ELk1 (Ser389)溶质携带物家族-1抗体0.1ml
Phospho-ELk1(Ser383)溶质载体蛋白家族20成员2抗体0.1ml
Phospho-ELk1(Thr417)溶质载体蛋白家族21成员2抗体0.1ml
Phospho-eNOS (Ser116)溶质载体蛋白家族35成员C2抗体0.1ml
Phospho-eNOS (Ser1176)溶质载体家族39成员11抗体0.1ml
Phospho-eNOS (Ser1177)溶质载体家族蛋白21成员1C1抗体0.1ml
Phospho-eNOS (Ser615)溶质载体家族蛋白22成员5抗体0.1ml
Phospho-eNOS (Ser632)溶质载体锌转运3抗体0.1ml
Phospho-eNOS (Thr113)溶质转运蛋白家族22成员17(多肽抗原)0.1ml
Phospho-eNOS (Thr495)溶质转运蛋白家族44成员1抗体0.1ml
phospho-Ep300 (Ser1834)肉豆蔻酰基转移酶2-N端肽抗体0.1ml
phospho-Ep300 (Ser89)肉毒碱O-乙酰基转移酶0.1ml
phospho-EPB41 (Tyr418 + Tyr660)肉毒碱棕榈酰基转移酶1A多肽抗原0.1ml
phospho-EPH A3+A4+A5 ( Tyr779)肉毒碱棕榈酰基转移酶1A抗体0.1ml
phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596)肉毒碱棕榈酰基转移酶1B抗体0.1ml
phospho-Eph receptor B1 (Tyr928)肉毒碱棕榈酰基转移酶2抗体0.1ml
