中国仓鼠卵巢细胞现货供应【温馨提示】
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
产品名称:中国仓鼠卵巢细胞现货供应
规格:5×106
运输方式:干冰或者活体细胞运输,保证细胞运输中的存活率。
特点:细胞代数为4-5代左右。
包装:内层无菌自封袋、专用防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。
细胞特性
1)来源:中国仓鼠卵巢
2)形态:可贴壁生长(上皮细胞样),也可悬浮生长(圆球形)
3)含量:>1x106 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
培养条件:贴壁生长时,选择DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L, 添加0.2 mM 脯氨酸,0.001 mM氨甲蝶呤),90%;优质胎牛血清,10%。
[MTX是基因DHFR产物的抑制物。当培养基中存在MTX时,MTX可渗入细胞内与DHFR蛋白结合,使核苷酸的合成受阻。但是DHFR基因连同其附近几千KB的DNA还会扩增以满足核苷酸合成的需要。理论上MTX浓度越大,DHFR基因扩增越多,与DHFR基因连锁的目的蛋白基因也表达得越多]
悬浮培养时,请使用悬浮生长专用培养基,培养基为:EX-CELL CD-CHO CHO Serum-free Medium,Chemically Defined(Sigma-Aldrich,货号:24361C)
添加物:
L-谷氨酰胺(Sigma-Aldrich,货号:G8540-25G)
Anti-Clumping Agent(Gibco,货号:01-0057AE)
备注:CD-CHO CHO Serum-free Medium请按照培养基配制说明书配制,L-谷氨酰胺配制浓度为200mM,工作浓度为8mM(即稀释25倍,如500ml CHO Serum-free Medium 中添加20ml 200mM L-谷氨酰胺,抗结团剂使用为1%,即500ml CHO Serum-free Medium 中添加5ml 抗结团剂)
1)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
2)冻存液:90%完全培养基(贴壁生长冻存时)或90%悬浮培养基(悬浮生长时),10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中国仓鼠卵巢细胞现货供应操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
中国仓鼠卵巢细胞现货供应温馨提示:
1)公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代,不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
2)公司细胞资源中心承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件,中心不保证其准确性。
3)从文献等处引用的信息本中心未进行核实,仅供参考。
4)使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规,充分考虑可能存在的风险和责任,采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
phospho-Tau protein(Ser733)丝裂原活化蛋白激酶4抗原0.5mg
phospho-Tau protein(Ser739)丝裂原活化蛋白激酶6抗体0.5mg
phospho-Tau protein(Thr181)丝裂原活化蛋白激酶8相互作用蛋白1抗体0.5mg
phospho-Tau protein(Thr205)丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体0.5mg
phospho-Tau protein(Thr212)丝裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗体0.5mg
phospho-Tau protein(Thr231)丝裂原活化蛋白激酶MAP4K6抗体0.5mg
phospho-Tau protein(Thr498)丝裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原0.5mg
phospho-Tau protein(Thr522)丝裂原活化蛋白激酶MKK3抗体0.5ml
phospho-Tau protein(Thr529)丝裂原活化蛋白激酶MKK6抗体0.5mg
Phospho-TBK1 (Ser172)丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体0.5mg
phospho-TCF3 (Ser39)丝裂原活化蛋白激酶p38(抗原)0.2ml
phospho-TCF3(Thr355)丝裂原活化蛋白激酶p38α抗体0.5mg
Phospho-TCTP(Ser46)丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体0.5mg
phospho-TEM8 (Tyr382)丝裂原活化蛋白激酶激酶0.5mg
phospho-TERT(Ser1125)丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体0.5mg
Phospho-TH (Ser31)丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗原0.5mg
Phospho-Tie2 (Ser1119)丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体0.5mg
Phospho-TIE2 (Tyr1102)丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体0.5mg
Phospho-TIE2 (Tyr1108)丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体0.5mg
Phospho-Tie2 (Tyr992)丝裂原活化蛋白激酶激酶5抗体0.5mg
Phospho-TIF1 beta(Ser824)丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体0.5mg
1,7-二溴庚烷;溴化七亚甲基DiMethyl p-phthalate;Methyl p-phthalate;DMT9001/6/3
1,8-桉树脑1,2,4-Butanetriol9002/1/1
1,8-二氮杂双环[5,4,0]十一碳-7-烯Diethyl sulfide;Thioethyl ether;1,1′-Thiobisethane9002/4/4
1,8-二碘辛烷 98%Phenylhydrazine9002/10/2
1,8-二羟基蒽醌;1,8-二羟基-9,10-蒽二酮L-Arginine;L-α-AMino-δ-guanidovaleric acid;L-Guanidine aMinovaleric acid;Nδ-AMidino-L-ornithine9003/1/4
1,8-二溴辛烷;八亚甲基二溴Ethylene glycol diMethyl ether;DiMethyl cellosolve;Glycol diMethyl ether;GDME;MonoglyMe;GlyMe9003/4/7
1,8-萘二甲酸酐AluMiniuM hydroxide;Hydrated aluMina;AluMinuM trihydrate9003/5/8
中国仓鼠卵巢细胞现货供应1,8-辛二醇Quinhydrone;Molecular coMp.of p-benzoqui and hydroqui;2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione coMpd with 1,4-benzene diol(1∶1)9003/11/6
1,9-二溴壬烷;九亚甲基二溴Ethyl benzoate9004/7/3
1.1.1-三氯乙烷2-Naphthol;β-Hydroxynaphthalene;2-Hydroxynaphthalene;Isonaphthol;2-Naphthalenol;C.I.375009011/4/5
1.1.3.3-四乙氧基丙烷 95%AMMoniuMsulphate9013/2/9
1.10-癸二醇Urea;8-Hydroxyxanthine;2,6,8(1,3,9)-Purinetrione;7,9-Dihydro-1H-purine-2,6,8-(3H)-trione9014/1/1
1.2.4-三氮唑puriss≥99.0%L-Cysteine Hydrochloride;L(+)-α-AMino-β-thiopropionic acid hydrochloride;L(+)-AMino-α-Mercaptopropionic acid hydrochloride9029/12/3
1.2-丁二醇1,4-Butyrolactone;1,4-Butanolide;1,2-Butanolide;γ-Hydroxybutyric acid lactone;4-Hydroxybutyric acid-γ-lactone9031/11/2
1.2-二溴丙烷Quinine;Quinine base;(8α;9R)-6′-Methoxycinchonan-9-ol9033/6/1
1.2-环己二胺SODIUM AMMONIUM PHOSPHATE9041/8/1
1.2-环氧环己烷D-Phenylalanine;D-α-AMino-β-phenylpropionic acid;(R)-(+)-Phenylalanine;(R)-2-AMino-3-phenylpropionic acid;D-β-Phenylalanine9082/7/9
1.2-双(氨基甲氧基)乙烷4-Nitroaniline100-00-5
1.3.5-三乙基苯PotassiuM sulfate;Tartarus vitriolatus;Salt of leMery100-01-6
1.3-丁二烯¤(-)-Camphanic acid chloride100-02-7
1.3-二甲基-2-咪唑啉酮(+)-Diisopinocampheyl chloroborane100037-69-2
1.3-二甲基巴比妥酸1-(Ferrocenyl)ethanol100-06-1