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Biotin标签蛋白检测-链霉亲和素, HRP辣根过氧化物酶标记
亲合素主要包括卵白亲合素(Avidin,A)、链霉亲合素(Streptavidin,SA)、卵黄亲合素及类亲合素等。后两种因其特异性亲合力低,研究不多,前两种目前已深入研究并得到广泛应用。其中链霉亲合素(SA)是与亲合素(A)有类似生物学特性的一种蛋白质。是由Streptomyces avidin菌在培养过程中分泌的一种蛋白质产物,SA也可通过基因工程手段生产。SA分子量为65000,由4条序列相同的肽链构成,每条SA肽链可以结合1个生物素分子。近年大量研究证实,生物素—亲合素系统几乎可与目前研究成功的各种标记物结合。在生物素-亲和素系统中,借助所形成的亲和素-生物素-酶复合物,追踪生物素标记的抗原或抗体,通过酶催化底物显色,可检出相应的抗体或抗原。
产品名称 | 应用类型 | 货号 | 规格 |
HRP-Streptavidin | WB,IHC,ELISA | 100ul/500ul |
使用HRP直标链霉亲和素产品,快速、特异性检测生物素化蛋白质
辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(SA-HRP)由链霉亲和素(Streptavidin, SA)和辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase)交联所得,可用于生物素化的抗体、蛋白、组织、细胞、核酸等样品的检测,常作为信号放大器,提高检测灵敏度。
链霉亲和素(SA)为4个相同亚基形成的四聚体蛋白质,分子量约为60 kDa,可以高度特异性地与生物素(Biotin)结合,1个SA可以结合4个生物素。与鸡蛋清来源的亲和素(Avidin)相比,SA无糖基化、等电点为中性或略酸性,因此SA的非特异性结合比Avidin低很多,用于检测时非特异性背景就很低。
辣根过氧化物酶(HRP)是一种含亚铁血红素的糖蛋白,分子量约为40 kDa,糖含量18%,显棕色。能与底物孵育,产生一种着色、荧光或发光标记的分子衍生物,这种现象使之广泛应用于分子生物学、生物化学、免疫学等领域的检测。
下表为常规用途的推荐稀释比例,实际试验操作过程中可根据具体实验情况适当调整HRP-SA的稀释比例。以常规的Western bolt为例,每次检测需要10 ml 1:2000的稀释液,每次只需5 μl(5 μg)。
WB | ELISA | IHC/IC |
1:500 - 1:5000 | 1:200 - 1:500 | 1:200 - 1:500 |
注意事项:
1)溶解后放置在冰浴上并尽量马上使用;
2)若一次性用不完,请在使用前配制成母液并分装成小规格(保证一次试验的用量)保存在-65℃,避免反复冻融影响蛋白活性
3)避免使用强酸、强碱、强氧化剂、高浓度的有机溶剂等易引起蛋白质变性的试剂;
4)本产品仅限于科研使用。
原创作者:武汉艾美捷科技有限公司