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技术文章
威正翔禹生物科普:关于胎牛血清知识问答(一)
点击次数:21354 发布时间:2017/12/20 16:11:37
科普:关于胎牛血清知识问答(一)
前面我们说过了如何鉴别胎牛血清的质量,但是关于如何保存胎牛血清,也是很多初次接触细胞培养的实验人比较关注的问题。今天,小编就为大家分享一下关于胎牛血清的一些常识。
1、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?
答:血清推荐融化方法(三步法)
| 温度 | 100ml | 500ml | 1000ml |
步 | 室温 | 35min | 90min | 100min |
| 或15-20℃水浴 | 5min | 18min | 20min |
第二步 | 20℃水浴 | 15min | 25min | 30min |
第三步 | 37℃水浴 | 20min | 35min | 45min |
但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
2、血清中包含絮状沉淀是什么,怎么处理?
答:沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。
如何避免血清中产生沉淀?
答: 按如下操作可避免沉淀的产生:
(1)解冻血清/分装冻存时,须规则摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
(2)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
(3)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
4、 培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗?
答:一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
原创作者:北京缔一生物科技有限公司