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技术文章

人畜共患病原菌——产气荚膜梭菌

点击次数:21475 发布时间:2018/8/2 16:02:46

 产气荚膜梭菌是一类革兰氏阳性(G+)产芽胞的厌氧性梭菌,广泛分布于污水、土壤、食物、人畜粪便及肠道中,是人畜共患病原菌。已经研究发现该菌能产生15种外毒素,其中*重要的致死性毒素有α、β、ε、ι 四种,按分泌毒素的类型可将该菌分为 A、B、C、D、E 五种。产气荚膜梭菌是引发组织毒害感染(如人类气性坏疽)和肠道疾病(如人类 D 型产气荚膜梭菌食物中毒和家畜肠毒血症)的重要因素。因此,有效的分离和鉴定产气荚膜梭菌对人类健康有着重要意义。

 

有报道指出,大肠菌群作为水质微生物学指标是不可靠的,而产气荚膜梭菌可作为一个水污染的指示菌。欧洲已将其作为水质卫生标准的补充条款,WHO已在水质检测中将其作为水质污染的微生物。产气荚膜梭菌数量与水污染程度有一定的相关关系。我国《食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》GB8538—2016规定,天然矿泉水产品和水源水需检测产气荚膜梭菌。


目前,检测产气荚膜梭菌多采用培养基法和PCR法。HiMedia公司(知名微生物培养基生产商)生产的M-CP平板——梭菌显色培养基M1354(膜过滤法),根据Armon和Payment的配方而成。培养基中的胰蛋白䏡、酵母粉提供氮源营养,蔗糖提供碳源营养。溴甲酚紫为pH指示剂。吲哚β-D-葡萄糖苷为β-D-葡糖苷酶或纤维二糖酶的显色底物,二磷酸酚酞用于检测酸性磷酸化酶。添加的D-环丝氨酸和多粘菌素B(FD153)抑制伴随的其他菌群。厌氧环境也提供了进一步的选择性。当黄色(纤维二糖酶阴性)菌落在暴露于氨烟30秒后变为玫瑰红时,即可认为是产气荚膜梭菌。颜色鉴别有时是困难的,因此,可挑取典型菌落(黄变粉色)和非典型菌落(绿色或没变色)进行验证。验证试验可通过硫还原、革兰氏阳性、芽孢杆状、无动力性、硝还原、明胶液化、乳糖发酵和其他生化试验证实。实践证明,采用快速膜过滤技术和显色培养基(M-CP培养基),简单、易行、可靠,HiMedia公司生产的M-CP培养基在上得到广泛应用,如 Raed S. Al-Wasify等人,用显色介质检测水中某些病原菌的敏感性和特异性(Raed S. Al-Wasify, Al-Sayed A. Al-Sayed  and Mohamed M. Kamel. Sensitivity and Specificity of Chromogenic Media for Detection of Some Pathogens in Water[J]. International Journal of Environment and Sustainability, 2013, 2(1): 1-9.)

原创作者:北京缔一生物科技有限公司

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