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技术文章

弧菌显色培养基(国标)

点击次数:21307 发布时间:2020/3/19 17:56:31

 

货号

品名

规格

储存条件

保质期

MV1682

HiCrome Vibrio HiVeg Agar

100G,500G

2-8℃

干粉见标签有效期。制备好的培养基建议在1周内使用

 


背景                                 

弧菌天然是生长在海水中,它们需要氯化钠才能生长,有些弧菌物种也可在很低的氯化钠浓度下生长1。弧菌造成人类霍乱和食物中毒。霍乱弧菌引起的霍乱爆发可以追溯到人类早期对肠道感染的描述。弧菌也受到了海洋微生物学家的关注。他们观察到在近海水域易于培养的细菌种属以及那些与鱼和水生贝壳类动物有关的细菌种属主要是弧菌属1。由于摄入了生牡蛎等污染的食物,霍乱弧菌会引起霍乱。副溶血性弧菌是食源性感染的主要原因,引起食物中毒2

 

原理                            

既往传统使用的弧菌分离培养基,是TCBS琼脂和碱性蛋白胨水3。但蔗糖发酵菌会影响TCBS琼脂上弧菌的鉴定。HiCrome弧菌显色培养基上,弧菌的显色并不受到其他细菌菌落的影响。这是因为,所显颜色的取决于细菌β-半乳糖苷酶和培养基中所包含底物的反应4。霍乱弧菌呈紫色,副溶血性弧菌呈蓝绿色。培养基中:HiVeg蛋白胨为微生物提供含碳源、氮源和必需的营养。氯化钠的高浓度除了维持渗透压平衡,也对伴随的微生物群落有抑制作用。在配方中使用硫代硫酸钠、柠檬酸钠和胆酸钠,因为它们可抑制革兰氏阳性菌和一些革兰氏阴性菌的生长,但肠杆菌科成员除外。该培养基中的所独有的显色混合物有助于霍乱弧菌和副溶血性弧菌的显色鉴别。培养基的高(碱性)pH有助于选择性分离弧菌属。

 

应用                             

弧菌显色培养基  用于海产品中分离和选择性显色鉴别弧菌属。

 

培养基组分                          

成分                              g/L

HiVeg蛋白胨                  10.000

氯化钠                           25.000

硫代硫酸钠                     5.000

柠檬酸钠                        6.000

胆酸钠                            1.000

显色混合物                      5.500

琼脂                               15.000

*终pH(在25℃)         8.5±0.2

 

质量控制                          

● 外观——淡黄色至浅棕色均匀自由流动的粉末

● 成胶性——牢固,与1.5%琼脂凝胶相当

● 制备好的培养基颜色和透明度——在平皿中为浅黄色,略不透明凝胶

● 配比浓度——在25℃下6.75%w/v(6.75g/100ml水)水溶液,  pH:8.5±0.2

● pH值——8.30-8.70

 

配制                              

1000毫升蒸馏水中溶解67.5克。 加热至沸腾以完全溶解。不要高压灭菌。冷却到45-50°C。 在倒入无菌培养皿之前充分混合。

 

培养结果                           

 

在35-37℃温育18-24小时后观察到的培养特征。

 

菌株

接种(CFU)

生长

恢复率

菌落颜色

粪肠球菌ATCC 29212

≥103

抑制

0%

 

大肠杆菌ATCC 25922

≥103

抑制

0%

 

金黄色葡萄球菌ATCC 25923

≥103

抑制

0%

 

霍乱弧菌ATCC 15748

50-100

好—旺盛

≥50%

紫色

副溶血性弧菌ATCC 17802

50-100

好—旺盛

≥50%

蓝绿色


 


 

参考文献                             

1.Thompson et al (ed.). 2006. The Biology of Vibrios, ASM Press, chapter 1, pg 3.

2.Alcamo. E.I, 2001. Fundamentals of Microbiology, 6th ed, Jones and Bartlett Publishers, Inc. pg 254, 244.

3.Clesceri, Greenberg and Eaton (ed.). 1998. Standard Method for the examination of Water and Waste water, 20th ed. American Public Health Association, Washington, D. C.

4.Kudo. H. Y et al, 2001. Improved Method for Detection of Vibrio parahaemolyticus in Seafood. ASM. Vol 67, No. 12, pg 5819-5823.

 

产品引用文献                         

1. Sudha, S., et al., Prevalence and distribution of Vibrio parahaemolyticus in finfish from Cochin (south India). Veterinaria Italiana, 2012. 48(3): p. 269‐281

2. Francis Bini, Santha Sudha and A. M. Hath.Efficacy of Sodium Tripolyphosphate and Non-Phosphate Additives on the survival of Vibrio parahaemolyticus on Prawns (Fenneropenaeus indicus) (H. Milne-Edwards, 1837) during Frozen Storage.Fishery Technology.2017,54:265-272

3. Karina Grigoryan, Grigori Badalyan,Armine Harutyunyan, Mariam Sargsyan.Prevalence of gram negative and oxidase positive bacteria in trout processing factory.Journal of Hygienic Engineering and Design.2013:10-15

 

原创作者:北京缔一生物科技有限公司

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