养细胞时，除了支原体的检测需要定期进行外，支原体的预防和祛除也是一个重要方面。

它包括工作区域中的支原体的预防和祛除和培养箱水槽、水浴锅中预防支原体的污染。但一旦发生细胞培养时有支原体污染，应如何挑选支原体祛除剂呢？

这里指的支原体祛除剂，是加入到细胞培养基中来发挥作用。

德国MB有三种支原体祛除剂，都是加入到细胞培养基中使用。它包括：

1. 支原体祛除剂Zell Shield®

它是复合抗生素成分，抑制支原体蛋白和DNA合成，也抑制细菌和真菌。

适合细胞已发生支原体污染，但又不愿丢弃，希望继续培养（如已转染或大量扩增的细胞）的情况。

使用时需要采用悬浮冲洗法，并连续培养三代。具体流程如下：

据研究表明，约98％的支原体存在于细胞表面和细胞间隙。细胞传代时，用干净的PBS反复悬浮冲洗，就能把70%以上的支原体冲下来。

支原体直径在180~350nm之间，远远小于细胞直径。通过低速离心，很容易将细胞和支原体分离，弃上清即可祛除大部分支原体。

2. 支原体祛除剂Mynox® Gold（细胞保种用）

它含Mynox®和抗生素。Mynox®直接杀灭支原体，而非抑制。它适合珍贵细胞或不易获得的生物样本（如细胞种子）Mynox® Gold细胞毒性在5%以下，作用较温和，细胞需培养治疗4代。它尤其适合原代细胞和难养细胞的支原体的祛除。

3. 支原体祛除剂Mynox®（珍贵样本用）

它适合珍贵细胞、不易获得的生物样本或病毒收获液。

它和Mynox® Gold的区别是：它所含的Mynox®浓度比Mynox® Gold高，细胞毒性为5%~80%（具体看细胞类型），只需治疗1次（≤3小时），即可根除支原体。它更适合容易生长的细胞。

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原创作者：北京缔一生物科技有限公司