通常，如果怀疑细胞有支原体污染，可直接取细胞上清进行支原体PCR检测。因为存在支原体污染的细胞上清中，支原体密度为通常为10⁶-10⁸个/ml，已足以用于PCR检测。Minverva公司生产的支原体PCR试剂盒灵敏度高，特异性好，检测的支原体种类多，很受用户的欢迎。但有时，支原体检测前，还需对样品中的支原体DNA进行提取。那么，什么时候需要提取呢？

有如下几种情况。如细胞培养液中存在抑制PCR的物质，这时就需要提取。细胞培养基中的血清浓度如果超过12%，那么对下游的PCR反应会产生抑制。酚红，对荧光定量PCR的检测也会干扰。这些均可以通过使用Miverva公司的支原体DNA提取试剂盒来克服。对于样品类型是细胞团、疫苗、冻存细胞和石蜡包埋的组织，也需要提前提取DNA。另外，如果样品中蛋白含量高于10mg/ml，则先需要用蛋白酶K进行处理。

Minerva公司生产的Venor®GeM Sample Preparation Kit可从细胞上清和生物制品中分离支原体DNA，全程只需30分钟。分四步组成：细胞溶解，DNA特异性与层析柱结合，祛除残留的污染物和抑制剂，洗脱DNA。该试剂盒符合欧洲药典规范。

原创作者：北京缔一生物科技有限公司