细胞培养的一个重要环节是选择成分适合又营养丰富的细胞培养基。这其中以经典培养基添加5~10%的牛血清*wei常用，它能维持细胞活力，促进细胞增殖。

牛血清在细胞培养中提供细胞生长和增殖所需的生长因子、激素、蛋白、粘附和铺展因子和其他多种营养物质。

下面笔者结合缔一生物及专家意见，以及部分参考文献，列出牛血清储存、分装、解冻要点，以供初次接触细胞培养的新手或实验人员参考，以促进试剂的合理应用和细胞的顺利培养。

一、储存

要保证牛血清质量，牛血清必须贮于-20℃。不能长期存放于4℃和室温，否则影响血清品质。同时避免血清的反复冻融。

二、分装

如果1次无法用完1瓶血清，可将血清40~45mL分装于无菌的50mL离心管中，每次依用量取出。由于血清结冻时体积会增加约10％ ，装管时必须预留此膨胀体积之空问，否则易发生血清挤出容器发生污染，或容器冻裂。

三、解冻

要解冻使用血清时，应使用逐步解冻法，才不会使血清质量受损。具体解冻方法见下表，该方法系缔一生物与专家总结而成，可限度地保留因子活性，非常重要。

不同容积血清（100ml，500ml，1L）使用不同的融化方案，全程只需要大约2.5个小时。

需要严格按照三步法操作。如无法保证20℃水浴，也可用接近此温度的自来水。

在融化过程中要慢慢摇动，使血清混匀，但不要产生泡沫！

在解冻过程中必须注意的是，水浴时血清的平面要完全浸在水中。要一直规则均匀摇晃(小心勿造成气泡，不要产生泡沫，否则有损质量)，使温度与成分始终均一。勿直接由-20℃放至37℃快速解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生大量沉淀。

一般不需要对胎牛血清进行热灭活。因胎牛血清中补体系统尚不完全，影响极小。热灭活反而非常造成沉淀和导致部分因子失活。

以上意见希望能对你的实验带来帮助。

感谢缔一生物/威正翔禹生物提供相关内容。

参考文献

中华中医药学刊2009年6月《细胞培养实验中一些细节问题的探讨》

原创作者：北京缔一生物科技有限公司