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技术文章

CRISPR基因激活技术,有力揭示干细胞分化过程中的关键机理

点击次数:20836 发布时间:2020/12/9 15:15:08

 日前,来自杜克大学等机构的科学家,开发了一种新方法能将干细胞转化成为想要的细胞类型。这篇论文名为“Master Regulators and Cofactors of Human Neuronal Cell Fate Specification Identified by CRISPR Gene Activation Screens”,刊登在Cell Reports上。

利用CRISPR基因编辑技术,研究人员识别出哪些转录因子,可用于制造成熟的成体神经元。其实早在2016年,研究者Black等人就报道了一种方法,用以 CRISPR为基础的基因激活子来开启基因网络的表达,从而将成纤维细胞转化成为神经元细胞。

研究人员先从多能干细胞开始,对其进行工程化修饰,一旦变为神经元细胞,就会发出红色荧光。荧光越亮,分化为神经元的命运就越强。

随后研究人员制备出一个导向RNA文库,这些RNA针对的是所有转录因子的基因。研究人员向干细胞中引入了CRISPR基因激活剂和导向RNA文库以便每一种细胞仅能够接收一种单一的导向RNA,从而开启特定的基因靶点,随后研究人员根据细胞变红的程度进行分类,并对*红和*不红细胞中的RNAs进行测序,这即能揭示出哪些基因在开启后对促进分化为神经元有益。研究者还揭示出拮抗干细胞分化神经元的因子。

从干细胞转化为成熟神经元细胞的过程需要7天时间,大大缩短了时间周期,为帮助加速治疗神经系统疾病和开发新型检测技术,提供了很多帮助。

总之,基于CRISPR的基因激活技术对研究人类干细胞转化为具体类型细胞,提供了有力的研究工具。

 

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原创作者:北京缔一生物科技有限公司

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