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技术文章
细胞分裂过程中染色体的不正确分布会带来灾难性的后果
点击次数:20934 发布时间:2021/1/14 9:46:34
日本筑波-染色体形式的DNA是生命的基本组成部分,这已不是什么秘密。细胞分裂过程中染色体的不正确分布会带来灾难性的后果。不平衡的染色体拷贝或非整倍性是肿瘤的标志,并影响包括人类在内的所有生物的发育和存活。
细胞如何传播遗传物质已经使研究人员着迷了几个世纪。在2020年6月发表于《核酸研究》上的项研究中,筑波大学的研究人员在木村敬二副教授的带下,确定了种新的蛋白质复合体NWC,它参与了染色体的分布。
NWC与核仁(种无膜的核内结构)相关,并在细胞分裂过程中重新定位到染色体的外围。这种蛋白质复合物包含三种不同的蛋白质:NOL11,WDR43和Cirhin。NOL11通常与核仁相关,而WDR43和Cirhin是WD重复蛋白。木村副教授说:“这项研究很重要,因为迄为止,核仁蛋白的有丝分裂功能尚未得到充分表征。”
该团队使用免疫荧光技术检测了NOL11在人细胞中的定位。使用门的显微镜,蛋白质的位置可以通过其“发光”显示出来。他们发现,NOL11在有丝分裂或核分裂过程中位于染色体的外围。木村副教授解释说:“当我们检查NOL11蛋白时,我们意识到它没有任何功能性基序。然后,我们探索了它可能与其他蛋白复合的功能。”
使用的分子技术,研究团队确定了NWC复合物并对其进行了表征。他们检查了从复合物中去除单个蛋白质的效果,发现NWC定位于染色体并在有丝分裂中起作用需要所有三个组件。减少细胞中NWC的量会导致细胞周期进程不完全,从而导致染色体无法分离,错位,以及准确的染色体分布所需的蛋白质的位置和浓度存在缺陷,包括Aurora B,粘着蛋白复合物和组蛋白H3磷酸化。
Kimura副教授及其同事提出的结果表明,NWC通过允许Aurora B在着丝粒处积累(部分通过调节组蛋白磷酸化)而在有丝分裂染色体稳定性中发挥特定作用。NWC如何精确控制着丝粒附近的组蛋白磷酸化仍有待确定。
鉴于正确的染色体传播对于生命和疾病的预防至关重要,因此这些结果可能会成为寻找基因的新焦点,这些基因突变后会导致非整倍性或染色体拷贝失衡。
血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题,价格不菲的血清中含有诸如生长因子,维生素,氨基酸等珍贵物质,而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此,在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行,多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子、氨基酸等成分带来的负面影响,在我们的技术热线中常被提到的就是“是否该对血清进行热灭活”,下面我们就对胎牛血清的热灭活进行些探讨和解释。
血清热灭活操作步骤
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①选用与血清瓶同规格的对照瓶个。
②对照瓶内放入与血清等体积的水。
③温度预试。
对照瓶内插入2—3支经挑选的温度计(保证测试温度的准确性),放入水浴箱中,接通电源,调节温度控制钮,使水浴箱温度所示温度保持在56℃。
④血清灭活。
血清瓶与带温度计的对照瓶齐放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时, 定时30分钟。
⑤大瓶血清灭活后,进行分装。
⑥保存。
分装后,抽样做无菌试验,-20~-70℃保存。
原创作者:北京缔一生物科技有限公司