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技术文章
您对胎牛血清了解多少?
点击次数:20954 发布时间:2021/1/29 9:28:05
胎牛血清用于细胞培养不过百年历史,但发展得相当快,每年的需求量也不断上升。在胎牛血清和细胞培养技术的方面,国外起步较早,认识也较深入。应该说,胎牛血清在细胞培养基方面,具有无与伦比的优势。因为其营养全面,所以几乎适合所有类型的细胞生长,每种细胞都可以从中摄取自己所需的养分。而且,胎牛血清还含有适合细胞贴壁铺展以及抗氧化和解毒的成分,这使得它成为天然通用的优质培养基。
牛血清分为胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清。
【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,简称FBS):是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养,旦胚胎发育完全这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎,已接近足月,不能作为胎牛血清的原料来使用。
【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,简称NBCS):采自出生天~周内的新生牛;
【小牛血清】(Calf Serum):采自出生10-30天的小牛;
【成牛血清】(Adult Bovine Serum,简称ABS):采自成年牛收全血后分离得到血清。
胎牛血清含有丰富的胚胎发育过程中必须的些生长因子和激素等。胎牛血清在细胞培养方面通常优于其他类型的血清。由于胎牛从未接触过外界, 与新生牛和小牛血清相比,抗体含量明显降低,故抗体与培养细胞发生交叉反应的风险也较低,是理想的细胞生长补充剂。
据研究,胎牛血清中含有至少四百多种成分,而且这些成分的含量在不同批次的血清中存在波动,有时甚至波动较大。因此,在持续使用胎牛血清时,要注意尽量选同批次的。通常,同批次的血清数量有限,次大约不超过2000升。因此,在更换批次时,要注意观察细胞的生长和状态。
目,国内市面上的胎牛血清有进口,有国产。进口品牌有的较为知名,如Gibco,但价格很高,同时假冒也多。许多高仿的Gibco血清,和真品相比,瓶子及标签包装为相似,若不仔细观察,很难分辨出来。但实际上质量差别较大,假冒血清价格也较低。同时,在外包装上仍然会找到区别(如条形码、角标),但提是手边要有瓶真品的血清。
许多实验室经费有限,这时可选择性价比更高的血清。即与高端品牌血清的质量差不多,但价格要低些的血清,如Ausbian血清等。该品牌较为低调,但口碑不错,为细胞典藏等重大项目选血清。有些品牌血清,则只适用于培养些容易生长的细胞,对于些较为难养的细胞,则常常效果不佳。尤其是干细胞、体细胞,对培养环境较为敏感,因此,要注意进行辨别。同时,应注意查看血清的质控证书,尤其是病毒检测部分,它对保证血清质量非常重要。
血清的数据积累也可反映血清的质量。好血清培养出来的细胞形态舒展,增殖旺盛,镜下无杂质,细胞倍增时间和克隆率较为理想。同时,要注意血清对细胞培养的长期效果,因为有些影响短时间并不显现。血清内毒素也是值得注意的个方面,因内毒素会对细胞带来不良影响,因此应选用内毒素低的血清,效果方好。文献引用和报道也是血清使用数据的部分,反映血清的使用效果,
后还要注意品牌血清的供应情况,有些血清供应不稳定,这样就会对后期实验产生影响。
后祝大家实验顺利!
原创作者:北京缔一生物科技有限公司