常规PCR法：是根据支原体核糖体16s-23s rRNA的特异保守序列设计引物，对待检样本DNA进行扩增，通过对扩增产物的大小分析作出诊断。用于【细胞培养中支原体】污染的检测。本文缔生物为您做下分享。
 

 

优点：①灵敏度高，特异性好。②时间短，2-3小时出结果。③符合欧洲药典。④操作简单。

缺点：①对于已做支原体灭活处理的样品，由于支原体DNA仍旧存在其中，PCR结果会出现假阳性。（可用培养法做补充验证）。②不同厂家生产的试剂盒质量差异巨大（由于引物及内在设计不同），需谨慎选择，尽量在业人员推荐指导下使用。

『支原体常规PCR检测试剂盒』介绍

德国MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒，依据操作步骤的细微差别，分步法和经典法两类。此两类试剂盒较全球其他厂家同类产品，具有以下独特的优点：

①高特异性，270bp左右的条阳性对照条带，涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种，操作简单，结果易于观察。（使用MB的试剂盒，下表列出的支原体物种均为阳性，其他微生物或真核细胞均为阴性。根据16s rRNA序列的同源性比对，该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。）

②高灵敏度，1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。

③试剂盒含内控对照，可防止假阴性的发生。

④符合欧洲药典要求。

适用范围

A. 科研用户，细胞上清的筛查可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒（步法）。（详见下文）

【Venor® Gem OneStep (货号:11-8050)】或【Venor® Gem Advance (货号: 11-7096)】

B. 对于需遵循药典要求的生物制药企业，可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒（经典法）。

【Venor® Gem Classic(货号: 11-1050) 】+ Taq酶 (货号: 53-1050)】