欧洲药典第2.6.7章（EP 2.6.7）以及《日本药典》第G3章（JP G3），详细描述了如qPCR等方法的、基于核酸扩增技术（NAT）的支原体检测。这些药典中指出，如果需要用NAT法替代传统方法，则要求显示每毫升样品体积(CFU/ml)中10个菌落形成单位的检测，即灵敏度达到10CFU/ml。这种灵敏度验证是方法验证的一条必经之路。

然而，由于有一些细胞培养实验室、研究机构、生产线不配备符合支原体培养条件的标准化微生物实验室，很难实现在实验室中培养或处理活的、灵敏度测试的支原体菌落。10CFU灵敏度标准品（不可逆灭活的支原体）便应运而生。为了保障灭活菌株的使用效果，德国Minerva Biolabs潜心研制，将先 进的冻干粉技术用于支原体检测标准品的生产过程中，尽可能保障其运输过程中不被破坏，能够帮助科研人员实现更高灵敏度的检测验证。

产品虽好，但也需要配合科学的使用方法才能事半功倍。本期内容，说一下收到支原体检测标准品后应该注意什么。

开箱检查

德国Minerva Biolabs公司生产的标准品系列：

10 CFU Mycoplasma Sensitivity Standards：10 CFU支原体检测限标准品

100 CFU Mycoplasma Sensitivity Standards：100 CFU支原体检测限标准品

Quantification Standards DNA：支原体绝对定量标准品

Genomic DNA extracts：支原体基因组DNA

均在冷链环境下（2-8℃）运输，收到货物后，应尽快查看产品状态，例如：包装是否破损、管壁是否发生开裂等。若不会立刻进行实验，需将标准品再次放入2-8℃保存。

标准品温度平衡

标准品在不同温度下，可能会表现出不同的特性，忽略温度平衡可能会导致实验结果的不稳定性。

因此，在复溶前需对标准品进行温度平衡处理，以降低因温度突变引起的损坏或变性的可能性，使标准品温度逐渐接近溶解时的温度，减少温度变化造成的不良影响，避免基质温度过低导致冻干粉溶解困难，保证标准品在复溶过程中，保持稳定性和活性，提高实验灵敏度。

在复溶前，需要将标准品从2-8℃环境中转移至室温环境下，对其进行温度平衡，待所有成分与室温一致时，才可进行下一步操作。

温度平衡好后，将标准品放入低速离心机内，短暂离心，通过旋转，将附着在管壁的冻干粉末甩至瓶底，保障复溶后物质浓度稳定。

小心打开标准品离心管，沿管壁向每个离心管中，加入经过室温平衡的待检样品的同款基质1ml，室温孵育5分钟。不建议用移液器反复吹打，容易造成试剂的浪费。孵育好后，可以漩涡10秒，然后再低速离心机内旋转5秒，将管壁的液体甩下去。

原创作者：北京缔一生物科技有限公司