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胎牛血清血清灭活的目的
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详细内容
Ausbian特级胎牛血清
Ausbian Fetal Bovine Serum,Sterile
品名 | 货号 | 规格 | 价格 |
Ausbian特级胎牛血清 Ausbian Fetal Bovine Serum,Sterile | WS500T | 500ml/瓶 | 询价 |
批号:见瓶身
有 效期:5年
关于牛血清产品的概述
【牛血清】是细胞培养中重要的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养。
牛血清分为胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清。
【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,简称FBS):是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养,一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎,已接近足月,不能作为胎牛血清的原料来使用。
【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,简称NBCS):0—7天内(也有说法是0—30天内);
【小牛血清】(Calf Serum):采自出生30天——1年的小牛。
【成牛血清】(Adult Bovine Serum,简称ABS):采自成年牛收全血后分离得到血清。
所有血清出厂前均应经过严格质控,并附详细《检测报告》,如pH值、渗透压、内毒素、病毒检测、促细胞生长能力、无菌等检查。其中,由于内毒素直接参与细胞凋亡,对细胞培养结果影响较大,且不同批次的血清,内毒素差异又不易控制。
有下列情况者,对血清内毒素应格外留意筛选:
1.养干细胞时,干细胞对内毒素非常敏感,如果血清中内毒素≥3EU/ml时,干细胞很容易死亡。很多使用者,在血清在试用前,就通过提早审核该批次《检测报告》,以决定是否入围进行试用。
2.养免疫细胞时,过高的内毒素可诱导免疫细胞释放炎症因子,抑制小鼠红细胞集落的形成等。
3.基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果“失之毫厘,谬以千里”。在准备血清和其他试剂时,选择极低的内毒素(jinliang ≤1EU/ml),对实验至关重要;
4.原代培养、杂交瘤融合、细胞转染,或者肝细胞、神经细胞、内皮等难养细胞的扩增,这些都需要挑选好的血清给细胞以有力支持。因此,挑选更低的内毒素,是保证实验顺利的**步。
5.实验室有些细胞,需要长时间培养、长时间冻存,或者经常复苏、经常培养的,血清会经常或长时间作用于细胞。为保证细胞的健康,都应该选用更低内毒素的血清,以避免内毒素长时间对细胞的毒性影响。
总之,血清中内毒素含量过高,更容易导致细胞“亚健康”,造成数据不准,或细胞状态不良、老化、甚至死亡,导致试验中断失败。血清中的内毒素越低越好。全球细胞培养学会均依据内毒素对血清的品质进行分级和命名。
内毒素含量越低的血清,级别就越高,以胎牛血清为例:
当血清中内毒素含量≤10EU/ml时,此血清为特级胎牛血清;
当血清中内毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml时,此血清为优级胎牛血清;
当血清中内毒素含量≥ 25EU/ml时,此血清为标准级胎牛血清;
目前,由于同一厂家,不同批次的血清,内毒素数值也可能有较大差异,因此很多血清厂家在名称上已不注明级别。但使用者仍可通过检测报告,自行甄别挑选。
*胎牛血清,是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,其组成成份大部分已知,但还有一部分尚不清楚,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。
*胎牛血清在细胞培养方面通常优于其他类型的血清。由于胎牛从未接触过外界, 与新生牛和小牛血清相比,抗体含量明显降低,故抗体与培养细胞发生交叉反应的风险也较低,是理想的细胞生长补充剂。
*所有胎牛血清均在当地政府兽医部门的监督下从注册的出口屠场采集,符合动物协会要求。
*为避免不同供体间的个体差异,能够更好保证实验数据的连续性和稳定,应使用同批次血清。
同批次血清:
将经过初步检测合格的很多供体胎牛的粗血清,混合在一起,在低温条件下,经七次加压过滤,三次为0.1 µm无菌过滤处理,得到浅黄色,澄清,稍粘稠液体。同一批次血清质量上基本无差异。不同厂家一个批次产量差异较大,从100升到2000升不等。批次大,更利于试验的稳定和连续的可参照性。
*所有血清出厂前,均经过严格质控,每个批次附有详细完整的《检测报告》,包括:品名,货号,批号,血源地,生产日期,保质期,pH值、渗透压、血红蛋白、总蛋白、球蛋白、IgG、内毒素、无菌检查(细菌、真菌、支原体)、病毒检查(如BVD、牛腺病毒、细胞病变效应等)、促细胞生长能力、细胞毒性、BVD-1/2抗体检查等。
实验人对于新批次血清,应认真审阅《检测报告》,做好试用前筛选准备。(如何看懂《检测报告》,可登陆“缔一生物”官网,留言技术部,得到免费帮助。)
Ausbian澳洲进口特级胎牛血清在细胞培养中的作用:
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调节它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5.起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
7.参与细胞冻存。
在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(*常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定适宜浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。
Ausbian‍胎牛血清‍‍‍‍‍独特优势:
1.精选内毒素更低批次(≤3EU/ml),澳洲原装进口,是细胞典藏等重大项目十几年的稳定供应品牌。
2.新批次在试用前,提供试用服务,养细胞更放心。
3.每个批次产量800-2000升,试用满意的实验室批号优先锁定,保证大多数项目两年不需换批次,细胞试验数据稳定。
4.每年按厂家生产顺序,会有多批次平行供应,每个实验室专属批号管理,保证供货稳定。
5.为Ausbian血清用户免费提供申报支持,具有完整的检测报告,为各类项目的申报提供支持(同时为血清VIP用户在支原体检测、方法学验证等方面,提供更多免费延伸性技术帮助)。
6.针对特殊科研项目,可提供3-5个平行批次,让试验人有更多选择空间。
7.为Ausbian进口血清提供免费代储存服务,为储存空间不足的实验室提供可靠的血清仓储保护,按要求随时发货。
8.Ausbian血清从出厂,到实验室,全程低温冷链保护,确保血清无反复冻融。
9.免费真品保障,每个血清瓶身加贴Viansaga®易破损防伪标签,Ausbian品牌真品保护,逢假必究,为实验室做好售后保障。
10.免费无忧售后,所有实验室签收的Ausbian澳洲进口胎牛血清,从签收日开始计算,一年之内,血清在妥善保管、未开封未融化、且不影响二次销售的情况下,均可享受无条件退货或换货的售后保障。
11.免费专业帮助,汇集近二十年,千万个血清用户细胞培养经验,为各种细胞培养提供问题梳理分析,解决方案参考。
12.Ausbian品牌拥有全系列血清产品线:
Ausbian澳洲进口特级胎牛血清、细胞治疗专用胎牛血清(货号:WS500T(红点)),透析胎牛血清(货号:WS500TZ)等多系列产品,服务更专业。
储存条件
-20°C冻存。
胎牛血清解冻后,应按单次习惯用量分装,分装后的血清仍-20°C冻存。
若置于4°C的血清,应在一周内用完。
为保证更好的细胞培养效果,血清和培养基的配制,应遵循“现用现配”原则。配好的培养液,应于一周内用完。
血清避免反复冻融,避免在4°C或更高温度储存过久,否则会破坏血清中活性成分,影响血清品质。
血清融化 专业方法:
目的;更好保留血清中活性成分,使细胞培养更稳定。
推荐血清厂家专业融化方法(此方法通用,适用于所有种类的血清):
操作 | 温度 | 100ml | 500ml | 1000ml |
步骤一 | 室温 | 35 min | 90 min | 100 min |
或15-20℃水浴 | 5 min | 18 min | 20 min | |
步骤二 | 20℃水浴 | 15 min | 25 min | 30 min |
步骤三 | 37℃水浴 | 20 min | 35 min | 45 min |
注意:
在水浴过程中,血清的平面要完全浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动瓶身,使血清混匀,但摇动中尽量不要产生泡沫!
Ausbian澳洲进口特级胎牛血清使用说明
血清从-20℃取出后,融化,按推荐体积加入到基础培养基中,混匀,制备成新鲜完全培养基(整个操作需在无菌超净台中进行,注意无菌操作)。配制好的完全培养基推荐在4℃保存,应在1周内用完。
关于热灭活
胎牛血清不推荐热灭活。
热灭活一般是指在做免疫相关的试验中,通过加热灭活掉血清中的补体,以避免对免疫试验的影响。
在胎牛血清中,由于胎龄原因,尚未形成完整的补体系统,因此,胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。
并且,热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减,进而影响细胞培养效果。
若针对某些特殊试验,对于胎牛血清一定要做热灭活,上推荐热灭活的方法:40℃水浴,20min。
更多详情请访问缔一官网:www.dyshengwu.com