产品说明： NOX（EC 1.6.99.3）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将NADH氧化为NAD +。 该酶不仅参与NAD +的再生，而且与免疫反应密切相关。 NOX能够将NADH氧化为NAD +，NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联，蓝色的DCPIP被还原为 无色的DCPIP，在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。

注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。


需自备的仪器和用品： 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。


样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离： 1. 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂和 10µL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。 2. 将匀浆 600g，4℃离心 5min。将上清液移至另离心管中，11000g，4℃离心 10min。 3. 将上清液转移至另 EP 管中，即胞浆提取物，用于线粒体中泄露 NOX 活性测定。 4. 沉淀即为线粒体，加入 200µL 试剂二和 2µL 试剂三，反复吹打充分混匀，用于 NOX 活性测定，并用于蛋 白浓度测定。

原创作者：上海仁捷生物科技有限公司