人凋亡相关因子ELISA检测试剂盒-实验操作步骤
储存及有效期:
未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。
使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。
实验原理:
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
精密度:
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10% Inter-批间差: CV<13%
稳定性:
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
友情提醒:
试剂盒使用完毕后,请妥善处理相关耗材,避免环境污染!
人凋亡相关因子ELISA检测试剂盒-实验操作步骤
操作时应注意:
A. 使用移液器加液与移液枪头不能混用。
B. 洗板要干净,避免交叉污染。
C. 严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。
D. 请勿将样品或试剂洒到
仪器表面或内部,操作完成注意做好清洁工作。
E. 不要在测量过程中关闭电源。
F. 对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改酶免测定试剂盒参数,以达到zui佳效果。
G. 使用后盖好防尘罩。
H. 出现技术故障时应及时与厂家,切勿擅自拆卸酶标仪。
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原创作者:上海仁捷生物科技有限公司