产品简介 ：
    β-GC（EC 3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化 β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC 负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖；β-GC 水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味；β-GC 能够水解植物体内野黑樱苷，释放HCN，从而防止昆虫取食。
    β-GC 分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在 400nm 有吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算 β-GC 活性。
 

试验中所需的仪器和试剂：
    可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

产品内容 ：

提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 10mL 双蒸水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。

操作步骤 ：
一 、 样品 的前处理 ：
   (1) 细菌或细胞：
      收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照每 400 万细菌或细胞加入 400µL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率 20％，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），15000g，4℃，离心 20min，取上清，置冰上待测。

   (2) 组织：称取约 0.2g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆；15000g，4℃，离心 20min，取上清，置冰上待测。
二 、 测定操作表 ：

试剂名称（µL）  对照管  测定管
试剂一  400
试剂二  500  500
样本  100  100
迅速混匀，放入 37℃准确水浴 30min 后，立即放入沸水浴中煮沸 5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀（以保证浓度不变）
试剂一  400 
充分混匀，8000g，4℃，离心 5min，取上清液上清液  500  500
试剂三  1000  1000
充分混匀，室温静置 2min 后，用对照管调零，400nm 处测定吸光值 A

β-GC 活性单位的计算 ：
     标准条件下测定的回归方程为 y=0.32x -0.0027；x 为标准品浓度（µmol/mL），y 为吸光值值。
1、组织中 β-GC 活力的计算:
   （1）按样本蛋白浓度计算：
    单位的定义：每 mg 组织蛋白在反应体系中每小时产生 1µmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
   β-GC 活力（U /mg prot）＝(A+0.0027) ÷0.32÷反应时间（0.5h）÷蛋白浓度（mg/mL）=6.25×(A+0.0027)÷蛋白浓度（mg/mL）
   （2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每 g 组织在反应体系中每小时产生 1µmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
   β-GC 活力（U /g 鲜重）＝(A+0.0027) ÷0.32÷反应时间（0.5h）÷样本鲜重（g/mL）=6.25×(A+0.0027) ÷样本鲜重（g/mL）
2、细菌或培养细胞中 β-GC 活力的计算:
  （1）按样本蛋白浓度计算：
   单位的定义：每 mg 组织蛋白在反应体系中每小时产生 1µmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
   β-GC 活力（U /mg prot）＝(A+0.0027) ÷0.32÷反应时间（0.5h）÷蛋白浓度（mg/mL）=6.25×(A+0.0027)÷蛋白浓度（mg/mL）
  （2）按细菌或细胞密度计算：
   单位的定义： 每 1 万个细菌或细胞在反应体系中每小时产生 1µmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
   β-GC 活力 （U/10 4 cell ） ） = (A+0.0027) ÷0.32÷反应时间 （0.5h） ÷细菌或细胞密度 （10 4 /mL） =6.25×(A+0.0027)÷细菌或细胞密度（10 4 /mL）

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