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详细内容
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
人丙酮酸脱氢酶α(PDHα)酶联免疫吸附测定试剂盒包含:
1.酶标仪(450nm检测波长滤光片,570nm或630nm校正波长滤光片) 。
2.洗板机(可调注液量,保证每孔洗液加至0.35ml而不溢出)。
3.超净工作台,生物安全柜,通风柜。
4.高精度单道加液器(量程为0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
5.高精度多道加液器(8道或12道,量程为50-300μl).
6.37℃恒温箱。
7.低温离心机。
8.电冰箱(4℃,-20℃,-86℃).
人丙酮酸脱氢酶α(PDHα)酶联免疫吸附测定试剂盒标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人丙酮酸脱氢酶α(PDHα)酶联免疫吸附测定试剂盒操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。