ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
小鼠血管紧张素IV(Ang IV)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
小鼠血管紧张素IV(Ang IV)ELISA试剂盒其他产品信息:
小鼠ATP结合盒转运体G1(ABCG1)ELISA试剂盒RJ16746仁捷48T/96T
人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒RJ14633仁捷48T/96T
大鼠甲胺喋呤(MTX)ELISA试剂盒RJ15825仁捷48T/96T
人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)ELISA试剂盒RJ12150仁捷48T/96T
人糖链抗原50(CA50)ELISA试剂盒RJ14049仁捷48T/96T
豚鼠钙调素(CAM)ELISA试剂盒RJ18058仁捷48T/96T
植物单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)ELISA试剂盒RJ21767仁捷48T/96T
大鼠半胱氨酸蛋白酶1(Casp-1)ELISA试剂盒RJ15485仁捷48T/96T
人磷脂肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒RJ13329仁捷48T/96T
犬补体成分5a(C5a)ELISA试剂盒RJ19633仁捷48T/96T
猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒RJ18467仁捷48T/96T
人分泌粒蛋白1(嗜铬粒蛋白B)(CHGB/SCG1)ELISA试剂盒RJ12342仁捷48T/96T
小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒RJ17292仁捷48T/96T
人糖链抗原72-4(CA72-4)ELISA试剂盒RJ14050仁捷48T/96T
豚鼠γ干扰素诱导单核因子(MIG;CXCL9)ELISA试剂盒RJ18013仁捷48T/96T
鸭微管相关蛋白轻链3(LC3)ELISA试剂盒RJ20696仁捷48T/96T
犬血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒RJ19875仁捷48T/96T
人硫酸乙酰肝素(HS)ELISA试剂盒RJ13371仁捷48T/96T
小鼠白细胞介素17A(IL-17A)ELISA试剂盒RJ16941仁捷48T/96T
人粘蛋白7(MUC7)ELISA试剂盒RJ14782仁捷48T/96T
人恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)ELISA试剂盒RJ12276仁捷48T/96T
鸡趋化因子配体2(CCL2)ELISA试剂盒RJ20510仁捷48T/96T
人10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP10/CXCL10)ELISA试剂盒RJ11113仁捷48T/96T
人脱嘌呤;脱嘧啶核酸内切酶;氧化还原因子1(APE;Ref-1)ELISA试剂盒RJ14103仁捷48T/96T
大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA试剂盒RJ16345仁捷48T/96T
猴α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒RJ20766仁捷48T/96T
大鼠羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒RJ16143仁捷48T/96T
人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试剂盒RJ13194仁捷48T/96T
小鼠细胞色素P450(CYP450)ELISA试剂盒RJ17703仁捷48T/96T
大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒RJ16236仁捷48T/96T
犬组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA试剂盒RJ19931仁捷48T/96T
山羊血小板衍生生长因子BB(PDGFBB)ELISA试剂盒RJ20198仁捷48T/96T
人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA试剂盒RJ13982仁捷48T/96T
猴白细胞介素2(IL-2)ELISA试剂盒RJ20774仁捷48T/96T
小鼠肌骨素(Myostatin)ELISA试剂盒RJ17217仁捷48T/96T
兔子载脂蛋白B48(apoB48)ELISA试剂盒RJ21449仁捷48T/96T
人胆酸(CA)ELISA试剂盒RJ12135仁捷48T/96T
大鼠维生素B1(VB1)ELISA试剂盒RJ16313仁捷48T/96T
样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)