ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
植物维生素D(VD)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
植物维生素D(VD)ELISA试剂盒其他产品信息:
牛内毒素(ET)ELISA试剂盒RJ19174仁捷48T/96T
人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒RJ11675仁捷48T/96T
豚鼠P物质(SP)ELISA试剂盒RJ18007仁捷48T/96T
大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1(UGT1)ELISA试剂盒RJ16075仁捷48T/96T
人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)ELISA试剂盒RJ12110仁捷48T/96T
人卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)ELISA试剂盒RJ13382仁捷48T/96T
牛雌激素(E)ELISA试剂盒RJ18984仁捷48T/96T
人神经母细胞瘤抗体(NBAb)ELISA试剂盒RJ13823仁捷48T/96T
人肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒RJ13858仁捷48T/96T
牛MYHCIIXELISA试剂盒RJ18884仁捷48T/96T
大鼠分泌型卷曲相关蛋白1(sFRP1)ELISA试剂盒RJ15645仁捷48T/96T
大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒RJ15547仁捷48T/96T
兔D二聚体(D2D)ELISA试剂盒RJ20931仁捷48T/96T
小鼠叉头框蛋白01(FoxO1)ELISA试剂盒RJ16999仁捷48T/96T
犬白细胞介素5(IL-5)ELISA试剂盒RJ19616仁捷48T/96T
人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(MASP)ELISA试剂盒RJ12405仁捷48T/96T
人AT丰富结合域1A(ARID1A)ELISA试剂盒RJ11227仁捷48T/96T
大鼠间接胆红素(IBIL)ELISA试剂盒RJ15844仁捷48T/96T
鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA试剂盒RJ20373仁捷48T/96T
人载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒RJ14759仁捷48T/96T
犬肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒RJ19801仁捷48T/96T
兔晶体蛋白α抗体(Cryα-Ab)ELISA试剂盒RJ21139仁捷48T/96T
牛成纤维细胞生长因子23(FGF23)ELISA试剂盒RJ18976仁捷48T/96T
裸鼠环氧合酶2(COX-2)ELISA试剂盒RJ18192仁捷48T/96T
牛尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)ELISA试剂盒RJ19188仁捷48T/96T
大鼠氨乙酰丙酸δ合酶1(ALAS1)ELISA试剂盒RJ15409仁捷48T/96T
植物木质素(Lignin)ELISA试剂盒RJ21834仁捷48T/96T
大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒RJ16359仁捷48T/96T
牛鼻气管炎(BR)ELISA试剂盒RJ18959仁捷48T/96T
牛金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒RJ19121仁捷48T/96T
人半乳糖凝集素1(Galectin-1)ELISA试剂盒RJ11883仁捷48T/96T
牛热休克蛋白70(HSP70)ELISA试剂盒RJ19212仁捷48T/96T
豚鼠胃蛋白酶(GT)ELISA试剂盒RJ18119仁捷48T/96T
人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA试剂盒RJ13939仁捷48T/96T
人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒RJ12282仁捷48T/96T
鱼谷氨酸脱氢酶(GDH)ELISA试剂盒RJ21575仁捷48T/96T
小鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒RJ17336仁捷48T/96T
人白细胞抗原HLA-E ELISA试剂盒RJ13255仁捷48T/96T
牛可溶性CD86(B72/sCD86)ELISA试剂盒RJ19136仁捷48T/96T
牛环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒RJ19085仁捷48T/96T
马血小板衍生生长因子BB(PDGFBB)ELISA试剂盒RJ19528仁捷48T/96T
兔子前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒RJ21422仁捷48T/96T
鸡泛素(Ub)ELISA试剂盒RJ20385仁捷48T/96T
大鼠新饱食分子蛋白1(Nesfatin-1)ELISA试剂盒RJ16399仁捷48T/96T
小鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒RJ17736仁捷48T/96T
样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)