ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人凝血酶原前体蛋白(PIVKA-II)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
人凝血酶原前体蛋白(PIVKA-II)ELISA试剂盒其他产品信息:
小鼠趋化素样因子1(CKLF1)ELISA试剂盒RJ17982仁捷48T/96T
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒RJ17875仁捷48T/96T
人α葡萄糖苷酶(α-Glu)ELISA试剂盒RJ11656仁捷48T/96T
兔子载脂蛋白B48(apoB48)ELISA试剂盒RJ21449仁捷48T/96T
犬维生素E(VE)ELISA试剂盒RJ19826仁捷48T/96T
鸡白细胞介素15(IL-15)ELISA试剂盒RJ20317仁捷48T/96T
人凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA试剂盒RJ13574仁捷48T/96T
兔Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒RJ20958仁捷48T/96T
人双酚A(BPA)ELISA试剂盒RJ13927仁捷48T/96T
人精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒RJ12877仁捷48T/96T
小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒RJ17342仁捷48T/96T
人钙卫蛋白(CALP)ELISA试剂盒RJ12395仁捷48T/96T
兔抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒RJ21149仁捷48T/96T
植物致敏蛋白(GFP)ELISA试剂盒RJ21924仁捷48T/96T
兔软骨蛋白聚糖G1;G2片段(G1;G2 AGC)ELISA试剂盒RJ21212仁捷48T/96T
小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFPL3)ELISA试剂盒RJ17732仁捷48T/96T
大鼠SKA2(SKA2)ELISA试剂盒RJ15306仁捷48T/96T
人促胰液素/分泌素受体(SR)ELISA试剂盒RJ12088仁捷48T/96T
大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒RJ15948仁捷48T/96T
大鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)ELISA试剂盒RJ15794仁捷48T/96T
猴子神经型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA试剂盒RJ20878仁捷48T/96T
兔干细胞因子(SCF)ELISA试剂盒RJ21066仁捷48T/96T
兔白介素1α(IL1α)ELISA试剂盒RJ20975仁捷48T/96T
牛妊娠特异性蛋白B(PSPB)ELISA试剂盒RJ19216仁捷48T/96T
牛色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒RJ19234仁捷48T/96T
兔基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒RJ21115仁捷48T/96T
人白细胞介素15(IL-15)ELISA试剂盒RJ11814仁捷48T/96T
山羊促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒RJ20118仁捷48T/96T
大鼠β-神经生长因子(β-NGF)ELISA试剂盒RJ15382仁捷48T/96T
大鼠末端补体复合物(SC5b-9)ELISA试剂盒RJ16045仁捷48T/96T
人肌腱蛋白c(TNC)ELISA试剂盒RJ13260仁捷48T/96T
兔黄嘌呤氧化酶(XOD)ELISA试剂盒RJ21101仁捷48T/96T
犬醛固酮(ALD)ELISA试剂盒RJ19788仁捷48T/96T
植物维生素K2(VK2)ELISA试剂盒RJ21880仁捷48T/96T
兔S100A5蛋白(S100A5)ELISA试剂盒RJ20952仁捷48T/96T
人尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)ELISA试剂盒RJ13542仁捷48T/96T
人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒RJ13423仁捷48T/96T
绵羊白细胞介素2(IL-2)ELISA试剂盒RJ19967仁捷48T/96T
兔Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)ELISA试剂盒RJ20916仁捷48T/96T
人乳酸脱氢酶A(LDH-A)ELISA试剂盒RJ13763仁捷48T/96T
人葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)ELISA试剂盒RJ13630仁捷48T/96T
人组织型纤溶酶原激活因子(tPA)ELISA试剂盒RJ15002仁捷48T/96T
样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)