ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人周期素依赖性激酶2(CDK2)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
人周期素依赖性激酶2(CDK2)ELISA试剂盒其他产品信息:
人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)ELISA试剂盒RJ11492仁捷48T/96T
大鼠α淀粉酶(AMS)ELISA试剂盒RJ15351仁捷48T/96T
兔结合珠蛋白(Hpt;HP)ELISA试剂盒RJ21134仁捷48T/96T
鸡前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒RJ20501仁捷48T/96T
大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒RJ16665仁捷48T/96T
小鼠孕酮(PROG)ELISA试剂盒RJ17891仁捷48T/96T
人脯氨酸羟化酶(PHD)ELISA试剂盒RJ13618仁捷48T/96T
兔神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒RJ21223仁捷48T/96T
人胶原吡啶交联(PYD)ELISA试剂盒RJ12822仁捷48T/96T
人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒RJ14393仁捷48T/96T
兔子α2巨球蛋白(A2M)ELISA试剂盒RJ21367仁捷48T/96T
人乙型肝炎病毒表面抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ14650仁捷48T/96T
山羊血管紧张素Ⅰ(ANGⅠ)ELISA试剂盒RJ20191仁捷48T/96T
兔补体成分5(C5)ELISA试剂盒RJ21006仁捷48T/96T
兔钙调磷酸酶调节蛋白1(RCAN-1)ELISA试剂盒RJ21056仁捷48T/96T
人Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)ELISA试剂盒RJ11197仁捷48T/96T
人血管紧张素Ⅱ受体1(ATR-1)ELISA试剂盒RJ14405仁捷48T/96T
绵羊肌酐(Cr)ELISA试剂盒RJ19998仁捷48T/96T
大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒RJ15717仁捷48T/96T
人胰岛素样生长因子3(IGF-3)ELISA试剂盒RJ14588仁捷48T/96T
犬CD6分子(CD6)ELISA试剂盒RJ19564仁捷48T/96T
猪巨噬细胞迁移抑制因子(糖基化抑制因子)(MIF)ELISA试剂盒RJ18492仁捷48T/96T
犬Ⅳ型胶原(ColⅣ)ELISA试剂盒RJ19554仁捷48T/96T
大鼠乙酰辅酶A羧化酶(AACase)ELISA试剂盒RJ16540仁捷48T/96T
大鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒RJ15823仁捷48T/96T
牛内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)ELISA试剂盒RJ19177仁捷48T/96T
小鼠低氧诱导因子-1(HIF-1)ELISA试剂盒RJ17064仁捷48T/96T
犬α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDHC)ELISA试剂盒RJ19587仁捷48T/96T
人可溶性CD44变体9(sCD44v9)ELISA试剂盒RJ13143仁捷48T/96T
人免疫球蛋白A1(IgA1)ELISA试剂盒RJ13424仁捷48T/96T
大鼠胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)ELISA试剂盒RJ16328仁捷48T/96T
鱼磷脂酶A2(PLA2)ELISA试剂盒RJ21614仁捷48T/96T
人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA试剂盒RJ11604仁捷48T/96T
人可溶程序性死亡分子-1(sPD-1)ELISA试剂盒RJ13127仁捷48T/96T
人抗Ku抗体(anti-Ku-Ab)ELISA试剂盒RJ12923仁捷48T/96T
小鼠糖原磷酸化酶(PYGL)ELISA试剂盒RJ17645仁捷48T/96T
猪环氧合酶2(COX-2)ELISA试剂盒RJ18448仁捷48T/96T
猪戊糖素(PE)ELISA试剂盒RJ18677仁捷48T/96T
样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)