ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
犬维生素E(VE)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
犬维生素E(VE)ELISA试剂盒其他产品信息:
大鼠16α羟基雌酮1(16-αOHE-1)ELISA试剂盒RJ15074仁捷48T/96T
鸡核因子κB受体激活因子配基(RANκL)ELISA试剂盒RJ20420仁捷48T/96T
微生物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)ELISA试剂盒RJ22005仁捷48T/96T
人白细胞介素28(IL-28)ELISA试剂盒RJ11835仁捷48T/96T
大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒RJ16435仁捷48T/96T
人Yes关联蛋白1(YAP1)ELISA试剂盒RJ11617仁捷48T/96T
微生物还原型谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒RJ21991仁捷48T/96T
兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒RJ21413仁捷48T/96T
大鼠Janus激酶2(JAK2)ELISA试剂盒RJ15249仁捷48T/96T
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒RJ14554仁捷48T/96T
牛亲环素B(CYPB)ELISA试剂盒RJ19208仁捷48T/96T
兔ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1型13(ADAMTS13)ELISA试剂盒RJ20918仁捷48T/96T
人白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)ELISA试剂盒RJ11825仁捷48T/96T
大鼠高分子量激肽原(HK)ELISA试剂盒RJ15683仁捷48T/96T
猪γ淀粉酶(AMY)ELISA试剂盒RJ18269仁捷48T/96T
山羊乳铁蛋白(LTF)ELISA试剂盒RJ20180仁捷48T/96T
小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒RJ17911仁捷48T/96T
鱼羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒RJ21640仁捷48T/96T
人抗可提取核抗原抗体(ENA-Ab)ELISA试剂盒RJ13005仁捷48T/96T
小鼠血管紧张素IV(Ang IV)ELISA试剂盒RJ17760仁捷48T/96T
鸡超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒RJ20351仁捷48T/96T
人骨桥蛋白(OPN)ELISA试剂盒RJ12523仁捷48T/96T
人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员2(EAR2)ELISA试剂盒RJ13907仁捷48T/96T
犬心钠肽(ANP)ELISA试剂盒RJ19849仁捷48T/96T
人三磷酸腺苷(ATP)ELISA试剂盒RJ13789仁捷48T/96T
猴子过氧化氢酶(CAT)ELISA试剂盒RJ20863仁捷48T/96T
人鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA试剂盒RJ13683仁捷48T/96T
羊传染性胸膜肺炎(pleuropneumonia)ELISA试剂盒RJ20232仁捷48T/96T
人轴突生长诱向因子4(Ntn4)ELISA试剂盒RJ14904仁捷48T/96T
人钙联蛋白(calnexin)ELISA试剂盒RJ12387仁捷48T/96T
大鼠膜结合型前列腺素E合成酶1(mPGEs-1)ELISA试剂盒RJ16043仁捷48T/96T
猪谷氨酰胺(Gln)ELISA试剂盒RJ18419仁捷48T/96T
牛N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒RJ18886仁捷48T/96T
土壤脲酶(UE)ELISA试剂盒RJ22280仁捷48T/96T
人磷脂肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒RJ13329仁捷48T/96T
人亮氨酸氨肽酶(LAP)ELISA试剂盒RJ13282仁捷48T/96T
人亮氨酰半胱氨酰氨肽酶(LNPEP)ELISA试剂盒RJ13286仁捷48T/96T
大鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒RJ16448仁捷48T/96T
兔α2纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒RJ20960仁捷48T/96T
猪血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒RJ18716仁捷48T/96T
样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)