ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒厂家特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒厂家其他产品信息:
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小鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒RJ17310仁捷48T/96T
兔血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒RJ21296仁捷48T/96T
兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒RJ21008仁捷48T/96T
大鼠超氧化物岐化酶(SOD)ELISA试剂盒RJ16691仁捷48T/96T
兔脂联素(ADPN)ELISA试剂盒RJ21336仁捷48T/96T
犬软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒RJ19792仁捷48T/96T
兔甲状腺素(T4)ELISA试剂盒RJ21122仁捷48T/96T
人玻连蛋白/体外粘连蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA试剂盒RJ11949仁捷48T/96T
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小鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA试剂盒RJ17444仁捷48T/96T
人肿瘤特异性移植抗原(TSTA)ELISA试剂盒RJ14891仁捷48T/96T
人胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒RJ14605仁捷48T/96T
小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒RJ16774仁捷48T/96T
牛维生素K依赖蛋白S(PROS)ELISA试剂盒RJ19288仁捷48T/96T
人环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒RJ12649仁捷48T/96T
人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA试剂盒RJ14156仁捷48T/96T
大鼠多肽YY(Peptide-YY)ELISA试剂盒RJ15624仁捷48T/96T
猪凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒RJ18574仁捷48T/96T
大鼠AKT蛋白(AKT)ELISA试剂盒RJ15154仁捷48T/96T
人肾胺酶(RNLS/MAOC)ELISA试剂盒RJ13853仁捷48T/96T
牛转录因子P65(RELA)ELISA试剂盒RJ19407仁捷48T/96T
大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒RJ16056仁捷48T/96T
牛干扰素α(IFNα)ELISA试剂盒RJ19042仁捷48T/96T
小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒RJ17319仁捷48T/96T
小鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒RJ17531仁捷48T/96T
大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒RJ16436仁捷48T/96T
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人细胞外信号调节激酶(ERK1;2)ELISA试剂盒RJ14238仁捷48T/96T
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人β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒RJ11684仁捷48T/96T
人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)ELISA试剂盒RJ12607仁捷48T/96T
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人H-rasELISA试剂盒RJ11421仁捷48T/96T
植物碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒RJ21942仁捷48T/96T
兔抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒RJ21151仁捷48T/96T
人百日咳毒素IgG抗体(PT IgG)ELISA试剂盒RJ11869仁捷48T/96T
大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒RJ15546仁捷48T/96T
鸡抑制素A(INHA)ELISA试剂盒RJ20610仁捷48T/96T
犬胆囊收缩素A受体(CCKAR)ELISA试剂盒RJ19657仁捷48T/96T
样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)