主要用途：呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒是一种旨在从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于动物软组织（肝或脑组织）和培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、能量代谢、蛋白组学和病理生理学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能稳定，分离产量和纯度堪称同类产品楷模。

呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒（化学处理法）

实验开始前，将－20℃冰箱里的净化液（Reagent C）取出冻融，然后移出xx毫升净化液（Reagent C）和xx毫升的裂解液（Reagent B）到15毫升锥形离心管里，混匀后，标记为裂解工作液，放进冰槽里备用。然后进行下列操作。

1． 手术取出动物组织，并秤重以确定1克组织重量（实验前使动物空腹12至24小时） 

2． （选择步骤）放进预冷的50毫升锥形离心管

3． （选择步骤）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次

4． 移入一个液氮冻存管

5． 即刻放入液氮罐过夜

6． 次日从液氮罐里取出，即刻（*快速度）碾碎组织成粉末（注意：切莫使组织冻融）

7． 放进一个15毫升锥形离心管

8． 加入xx毫升预冷的裂解工作液

9． 涡旋震荡5秒，充分混匀

10． 在冰槽里孵育2分钟，期间涡旋震荡5秒一次

11． 加入xx微升预冷的强化液（Reagent D）

12． 涡旋震荡5秒，充分混匀

13． 在冰槽里孵育5分钟，期间涡旋震荡5秒二次（注意：参见注意事项9）

14． 加入xx毫升预冷的保存液（Reagent E），轻轻摇动试管混匀

15． 放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为1500g

16． 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞

17． 放进4℃超速离心机离心10分钟，速度为10000g

18． 小心抽去上清液，保留沉淀颗粒——此步骤获得线粒体沉淀物

（注意：如果进行线粒体DNA萃取，直接进入线粒体DNA萃取试剂盒的步骤4，继续下去）

19． （选择步骤）加入xx毫升预冷的保存液（Reagent E）

20． （选择步骤）放进4℃超速离心机再次离心5分钟，速度为10000g

21． （选择步骤）小心抽去上清液

22． 加入xx毫升保存液（Reagent E），充分混匀

23． 即刻移入1.5毫升离心管，放进－70℃冰箱里

呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒保存方式

保存净化液（Reagent C）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月

呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒使用承诺

秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

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