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分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒

点击次数:378发布时间:2018/3/14 10:57:34

分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒

更新日期:2018/12/24 9:10:31

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒使用承诺:秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后2天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品

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详细内容

 分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒

分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒使用承诺秉着信誉至上、客户满意、质量承诺的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后2天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。

分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒(化学处理法)

实验开始前,将-20℃冰箱里的净化液(Reagent C)取出冻融,然后移出xx毫升净化液(Reagent C)和xx毫升的裂解液(Reagent B)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。然后进行下列操作。

1. 准备51075cm2细胞培养瓶的细胞(5 X 107),直至细胞生长铺满整个培养表面

2. 分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到每个细胞培养瓶,覆盖培养瓶表面,然后抽去

3. 重复实验步骤2一次

4. 加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,铺满整个细胞生长表面

5. 置入37培养箱3分种

6. 轻轻手击震动培养瓶,使细胞脱落

7. 分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液

8. 移入一个50毫升锥形离心管

9. 放进台式离心机离心10分钟,速度为200g

10. 小心抽去上清液

11. 加入xx毫升预冷的清理液(Reagent A

12. 放进台式离心机离心10分钟,速度为300g

13. 小心抽去上清液

14. 加入xx毫升预冷的裂解工作液

15. 涡旋震荡5秒,充分混匀

16. 在冰槽里孵育2分钟,期间涡旋震荡5秒一次

17. 加入xx微升预冷的强化液(Reagent D

18. 涡旋震荡5秒,充分混匀

19. 在冰槽里孵育5分钟,期间涡旋震荡5秒二次(注意:参见注意事项9

20. 加入xx毫升预冷的保存液(Reagent E),轻轻摇动试管混匀

21. 放进4台式离心机离心10分钟,速度为1500g

22. 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞

23. 放进4超速离心机离心10分钟,速度为10000g

24. 小心抽去上清液,保留沉淀颗粒——此步骤获得线粒体沉淀物

分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒注意:如果进行线粒体DNA萃取,直接进入线粒体DNA萃取试剂盒的步骤4,继续下去

25. (选择步骤)加入xx毫升预冷的保存液(Reagent E

26. (选择步骤)放进4超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g

27. (选择步骤)小心抽去上清液

28. 加入xx毫升保存液(Reagent E),充分混匀

29. 即刻移入1.5毫升离心管,放进-70冰箱里

分离线粒体纯度双酶法(SDH/AP)检测试剂盒保存方式

保存净化液(Reagent C在-20℃冰箱里,其余的保存在4冰箱里,有效保证6月

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