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丙酮酸脱羧酶（PDC）测试盒
点击次数：316 发布时间：2021/3/8 19:00:32
生化检测可以检测的样本类型的：
产品说明： PDC主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。 PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD +；NADH 在340nm有吸收峰，而NAD +没有；通过测定340nm光吸收下降速率，来计算PDC活性。 注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品： 台式离心机、紫外分光光度计、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水
PDC活性计算 1、血清（浆）PCD活力的计算： 单位的定义：37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）中，每毫升血清（浆）在反应体系中每分钟催化1μmol NADH 氧化定义为个酶活力单位。 PDC（U/mL）=ΔA×V反总÷(ε×d)×10 6÷V样本÷T=1.6×ΔA
2、 组织中PDC活力的计算：
（1）按样本蛋白浓度计算： 单位的定义：37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）中，每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化1μmol NADH 氧化定义为个酶活力单位。 PDC（U/mg prot）=ΔA×V反总÷(ε×d)×10 6÷(V样本×Cpr)÷T=1.6×ΔA÷Cpr （2）按样本质量计算： 单位的定义：37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）中，每g组织质量在反应体系中每分钟催化1μmol NADH 氧化定义为个酶活力单位。 PDC（U/g 质量）=ΔA×V反总÷(ε×d)×10 6÷ (W÷V提取×V样本)÷T=1.6×ΔA÷W
3、细菌或细胞中PDC活力的计算： 按细菌或细胞数量计算： 单位的定义：37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）中，每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟催化1μmol 的NADH氧化定义为个酶活力单位。 PDC（U/10 4 cell）=ΔA×V反总÷(ε×d)×10 6÷(V样本÷V提取×500)÷T=3.2×10 -3×ΔA÷Cpr ε：NADH摩尔消光系数，6.22×10 3L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应体系总体积，1mL=0.001L； V样本：加入反应体系中上清液体积，0.1mL；Cpr：蛋白浓度（mg/mL），需要另外测定；T：反应时间，1min； W：样本质量，g；V提取：提取液体积，1mL；500：细菌或细胞总数，500万；10 6：单位换算系数，1mol=10 6μmol
体液：血清(浆)、尿液、唾液等
组织：动植物组织
食品：果汁、蜂蜜、牛奶、红酒、巧克力等
其它：保健品、化妆品
产品说明： PDC主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。 PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD +；NADH 在340nm有吸收峰，而NAD +没有；通过测定340nm光吸收下降速率，来计算PDC活性。 注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品： 台式离心机、紫外分光光度计、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水
PDC活性计算 1、血清（浆）PCD活力的计算： 单位的定义：37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）中，每毫升血清（浆）在反应体系中每分钟催化1μmol NADH 氧化定义为个酶活力单位。 PDC（U/mL）=ΔA×V反总÷(ε×d)×10 6÷V样本÷T=1.6×ΔA
2、 组织中PDC活力的计算：
（1）按样本蛋白浓度计算： 单位的定义：37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）中，每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化1μmol NADH 氧化定义为个酶活力单位。 PDC（U/mg prot）=ΔA×V反总÷(ε×d)×10 6÷(V样本×Cpr)÷T=1.6×ΔA÷Cpr （2）按样本质量计算： 单位的定义：37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）中，每g组织质量在反应体系中每分钟催化1μmol NADH 氧化定义为个酶活力单位。 PDC（U/g 质量）=ΔA×V反总÷(ε×d)×10 6÷ (W÷V提取×V样本)÷T=1.6×ΔA÷W
3、细菌或细胞中PDC活力的计算： 按细菌或细胞数量计算： 单位的定义：37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）中，每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟催化1μmol 的NADH氧化定义为个酶活力单位。 PDC（U/10 4 cell）=ΔA×V反总÷(ε×d)×10 6÷(V样本÷V提取×500)÷T=3.2×10 -3×ΔA÷Cpr ε：NADH摩尔消光系数，6.22×10 3L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应体系总体积，1mL=0.001L； V样本：加入反应体系中上清液体积，0.1mL；Cpr：蛋白浓度（mg/mL），需要另外测定；T：反应时间，1min； W：样本质量，g；V提取：提取液体积，1mL；500：细菌或细胞总数，500万；10 6：单位换算系数，1mol=10 6μmol
原创作者：湖南鑫泰环保科技有限公司
