产品说明： 磷酸戊糖途径途径中 6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）和 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGDH）依次催化 NADPH 合成，与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外，6PGDH 逆境生理中具有重要作用。 6PGDH 催化 6-磷酸葡萄糖酸和 NADP +生成 NADPH，NADPH 在 340nm 有特征吸收峰，而 NADP +没有；通 过测定 340nm 吸光度增加速率，计算 6PGDH 活性。



注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。


6PGDH 活性计算

（1）按蛋白浓度计算 活性单位定义：每毫克蛋白每分钟催化产生 1nmol NADPH 的酶量为 1 个酶活单位。 6PGDH 酶活性(U/mg prot) =[(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ε×d)×10 9×V 反总]÷(Cpr×V 样)÷T =536×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷Cpr

（2）按样本质量计算 活性单位定义：每克组织每分钟催化产生 1nmol NADPH 的酶量为 1 个酶活单位。 6PGDH 酶活性(U/g 质量) =[(ΔA 测定-ΔA 空白)÷(ε×d)×10 9×V 反总]÷(W÷V 样总×V 样)÷T =536×(ΔA 测定-ΔA 空白)÷W ε：NADPH 摩尔消光系数，6.22×10 3L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应体系总体积，0.001L； Cpr：粗酶液蛋白质浓度，mg/mL，需要另外测定；V 样：反应体系中加入粗酶液体积，0.1mL；V 样总：提取液 体积，1mL；T：反应时间，3min；W：样本质量，g。