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L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
价格：￥1200
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2021/3/9 20:04:18更新时间：2024/5/29 11:50:41
产品摘要：生化检测可以检测的样本类型的： 体液：血清(浆)、尿液、唾液等 组织：动植物组织 食品：果汁、蜂蜜、牛奶、红酒、巧克力等 其它：保健品、化妆品
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详细内容
生化检测可以检测的样本类型的：
体液：血清(浆)、尿液、唾液等
组织：动植物组织
食品：果汁、蜂蜜、牛奶、红酒、巧克力等
其它：保健品、化妆品
测定意义：L-半乳糖途径是合成AsA 的主要途径。Gal LDH 位于线粒体内膜，负责催化植物体内AsA 生物合成的后步，也是该途径的关键酶之，对植物体内AsA 含量的积累起着至关重要的作用。
测定原理：Gal LDH 催化L-半乳糖内酯还原细胞色素c（Cyt c），还原型Cyt c 在550nm 有吸收峰。测定还原型Cyt c 增加速率，来计算Gal LDH 活性。
自备仪器和用品：台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
产品说明： L-半乳糖途径是合成AsA的主要途径。Gal LDH位于线粒体内膜，负责催化植物体内AsA生物合成的后步， 也是该途径的关键酶之，对植物体内AsA含量的积累起着至关重要的作用。 Gal LDH催化L-半乳糖内酯还原氧化型细胞色素c（Cyt c），还原型Cyt c在550nm有吸收峰；测定还原型Cyt c 增加速率，来计算Gal LDH活性。 注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 需自备的仪器和用品： 台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液器、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤： 、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 称取约 0.1g 样本，加提取液 1mL，冰上充分研磨，13000g 4℃离心 10min，取上清液置冰上待测。 二、测定步骤 1、 分光光度计预热30min，调节波长到550nm，蒸馏水调零。 2、 按样本数取出定量的试剂在25℃水浴锅中预热30min以上，其余的分装保存(-20℃)。 3、 空白管：依次在1mL比色皿中加入100μL蒸馏水、800μL预热的试剂和100μL试剂二，迅速混匀后于550nm比 色，记录10s和130s的吸光值，分别为A1，A2，ΔA空白管=A2-A1。 4、 测定管：依次在1mL比色皿中加入100μL上清液、800μL预热的试剂和100μL试剂二，迅速混匀后于550nm比 色，记录10s和130s的吸光值，分别为A3，A4，ΔA测定管=A4-A3。 三、Gal LDH 活性计算 （1）按蛋白浓度计算 Gal LDH活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟还原1μmol Cyt c为1个酶活单位。 Solarbio Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd Tel: 400-968-6088 Fax: 010-56371281/82 Http://www.solarbio.com第 2 页，共 2 页 Gal LDH (U/mg prot) = [(ΔA测定管-ΔA空白管)÷ε÷d×V反总×10 6]÷（Cpr×V样）÷T =0.289×(ΔA测定管-ΔA空白管) ÷Cpr （2）按样本质量计算 Gal LDH活性单位定义：25℃中每克样本每分钟还原1μmol Cyt c为1个酶活单位。 Gal LDH（U/g 质量）=[(ΔA测定管-ΔA空白管)÷(ε×d)×V反总×10 6]÷(V样÷V样总×W)÷T =0.289×(ΔA测定管-ΔA空白管) ÷W ε：还原型Cyt c摩尔消光系数，17.3×10 3L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应体系总体积，1mL=0.001L； 10 6：单位换算系数，1mol=1×10 6μmol；V样：加入反应体系中上清液体积，100μL=0.1mL；V样总：提取液体积， 1mL；Cpr：上清液蛋白浓度，mg/mL，蛋白质浓度需要另外测定；W：样本质量，g；T：反应时间，2min。
测定意义：L-半乳糖途径是合成AsA 的主要途径。Gal LDH 位于线粒体内膜，负责催化植物体内AsA 生物合成的后步，也是该途径的关键酶之，对植物体内AsA 含量的积累起着至关重要的作用。
测定原理：Gal LDH 催化L-半乳糖内酯还原细胞色素c（Cyt c），还原型Cyt c 在550nm 有吸收峰。测定还原型Cyt c 增加速率，来计算Gal LDH 活性。
自备仪器和用品：台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
产品说明： L-半乳糖途径是合成AsA的主要途径。Gal LDH位于线粒体内膜，负责催化植物体内AsA生物合成的后步， 也是该途径的关键酶之，对植物体内AsA含量的积累起着至关重要的作用。 Gal LDH催化L-半乳糖内酯还原氧化型细胞色素c（Cyt c），还原型Cyt c在550nm有吸收峰；测定还原型Cyt c 增加速率，来计算Gal LDH活性。 注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 需自备的仪器和用品： 台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液器、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤： 、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 称取约 0.1g 样本，加提取液 1mL，冰上充分研磨，13000g 4℃离心 10min，取上清液置冰上待测。 二、测定步骤 1、 分光光度计预热30min，调节波长到550nm，蒸馏水调零。 2、 按样本数取出定量的试剂在25℃水浴锅中预热30min以上，其余的分装保存(-20℃)。 3、 空白管：依次在1mL比色皿中加入100μL蒸馏水、800μL预热的试剂和100μL试剂二，迅速混匀后于550nm比 色，记录10s和130s的吸光值，分别为A1，A2，ΔA空白管=A2-A1。 4、 测定管：依次在1mL比色皿中加入100μL上清液、800μL预热的试剂和100μL试剂二，迅速混匀后于550nm比 色，记录10s和130s的吸光值，分别为A3，A4，ΔA测定管=A4-A3。 三、Gal LDH 活性计算 （1）按蛋白浓度计算 Gal LDH活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟还原1μmol Cyt c为1个酶活单位。 Solarbio Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd Tel: 400-968-6088 Fax: 010-56371281/82 Http://www.solarbio.com第 2 页，共 2 页 Gal LDH (U/mg prot) = [(ΔA测定管-ΔA空白管)÷ε÷d×V反总×10 6]÷（Cpr×V样）÷T =0.289×(ΔA测定管-ΔA空白管) ÷Cpr （2）按样本质量计算 Gal LDH活性单位定义：25℃中每克样本每分钟还原1μmol Cyt c为1个酶活单位。 Gal LDH（U/g 质量）=[(ΔA测定管-ΔA空白管)÷(ε×d)×V反总×10 6]÷(V样÷V样总×W)÷T =0.289×(ΔA测定管-ΔA空白管) ÷W ε：还原型Cyt c摩尔消光系数，17.3×10 3L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应体系总体积，1mL=0.001L； 10 6：单位换算系数，1mol=1×10 6μmol；V样：加入反应体系中上清液体积，100μL=0.1mL；V样总：提取液体积， 1mL；Cpr：上清液蛋白浓度，mg/mL，蛋白质浓度需要另外测定；W：样本质量，g；T：反应时间，2min。
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