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糜蛋白酶测试盒
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详细内容
糜蛋白酶催化 BTEE 水解,产物在 256nm 有特征光吸收;通过测定 256nm 光吸收增加速率,来计算糜蛋白酶 活性。
注意:实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
样本处理(1)组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取 液进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清即粗酶液。 (2)血清(浆):直接检测。
实验实例: 1、 取 0.1g 兔肾脏加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清后再用提取液稀释 10 倍,之 后按照测定步骤操作,测得计算ΔA=A2-A1=1.043-0.94=0.103,按样本质量计算酶活得: 糜蛋白酶活(U/g 质量)=3.8×ΔA÷W×10(稀释倍数)=39.14 U/g 质量。
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