犬高迁移率族蛋白A2（HMGA2）ELISA试剂盒说明书

ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种基于多孔板的免疫测定法，将通常作为检测成分的抗体或样品吸附在固体表面（此方法采多孔板）。ELISA以相对低廉的成本，快速、定量且灵敏地检测分析物，是简单的分析方法。此外，ELISA还可轻松改造为更高通量筛选方法，帮助研究人员通过单次运行检测大量样品。夹心法、直接法和竞争法ELISAs

我们的ELISA采用简单易用的方法，可用于研究血清、血浆、细胞培养上清液或裂解液等各种基质中的可溶性蛋白标志物。包括1000多种“仅供研究使用”的检测试剂盒，适用的样本类型包括人、小鼠、大鼠等各种动物模型（如农业和伴生动物）。每份试剂盒都提供特定实验方案及96孔板所需的试剂。ELISA试剂盒主要为96孔规格，目标物检测和定量所需试剂都由厂商提供。采用夹心法、直接法和竞争法等各种ELISA方法。

夹心法使用针对同一目标抗原不同表位的一对单克隆抗体(mAb)。固定在微孔板中的一抗，用于将蛋白从溶液中提取出来。二抗则用于完成“夹心”，提供表示目标抗原存在的信号。试剂盒提供重组形式的已知含量的抗原蛋白，方便用户建立标准曲线解析样品信号。我们大部分产品采用的都是这种夹心法ELISA。

直接法和竞争法比较少见。直接法先用一种单抗检测固定在微孔板上的样品。然后一抗会与的酶标二抗结合提供信号。

竞争法在微孔板上预包被已知含量的生物标志物。酶标抗体与样品共同孵育，并与预包被抗体进行“竞争性”结合反应，具体结果取决于样品中目标物的浓度。于是游离抗体能与微孔板上的抗原结合，并在样品洗去后呈现信号。该信号与目标标志物的浓度成反比。

血清：用无菌管收集，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2、血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3、尿液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

4、胸腹水：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5、脑脊液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

6、上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

7、细胞培养上清：检测分唾液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集泌性的成份时，用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

8、牛奶：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

9、蜂蜜：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

10、全血：用含有抗凝剂的无菌管收集，立即轻轻摇动，来回轻轻颠倒数次，使血液和抗凝剂混匀，以防血液凝固。

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