【种属分类】:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
【说 明 书】:
植物丙酮酸激酶(PK)elisa试剂盒说明书随货发送或给问销售索要 。
植物丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒提供代测服务 (1)、原装进口抗体——高效性、灵敏性、特异性
(2)、规范包被操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
(3)、的优化方案——回收利用率高、可靠性强
(4)、适用范围——适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
(5)、可检测指标齐全——生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
植物丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒说明书
注意:本试剂仅供研究使用,不能用于临床。
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠内毒素(ET)
elisa试剂盒捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的
植物丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
植物丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
5. 有效期:6个月
6. 检测范围:来电索取详细说明书
ELISA试剂盒样本处理方法:
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5. 植物标本的精采集及保存
1、 称取0.1g(误差±3%以内)新鲜植物组织样本,在液氮中充分研磨;
2、 加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度过夜;
3、 于4度,8000rpm,离心1小时,取上清;
4、 上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%乙mi(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干,保存备用;
5、 上样前加入pH7.4 PBS缓冲液(1ml定容)。混匀后室温放置30分钟,然后4度离心(8000rpm,15分钟),取上清并暂时保存于4度待用。
6.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
ELISA试剂盒计算解析方法例如:
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)
我司其他研发的ELISA试剂盒产品:
大鼠谷草转氨酶ELISA试剂盒RJ1669448T/96T
人E选择素(ESel)ELISA试剂盒RJ1139048T/96T
鹅催乳素(PRL)ELISA试剂盒RJ2072448T/96T
牛雌酮(E1)ELISA试剂盒RJ1898648T/96T
兔白细胞介素18(IL-18)ELISA试剂盒RJ2098548T/96T
犬生长分化因子15(GDF15)ELISA试剂盒RJ1980248T/96T
绵羊缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒RJ2002248T/96T
鸡钙蛋白酶(calpain)ELISA试剂盒RJ2038848T/96T
鸡维生素B2(VB2)ELISA试剂盒RJ2056148T/96T
大鼠16α羟基雌酮1(16-αOHE-1)ELISA试剂盒RJ1507448T/96T
大鼠蛋白磷酸脂酶(PP2A)ELISA试剂盒RJ1558648T/96T
人利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)ELISA试剂盒RJ1327148T/96T
大鼠noggin蛋白(NOG)ELISA试剂盒RJ1526848T/96T
大鼠CD30配体(CD30L)ELISA试剂盒RJ1518748T/96T
人己糖激酶II(HK-II)ELISA试剂盒RJ1276248T/96T
人肌肽(CAR)ELISA试剂盒RJ1269948T/96T
羊褪黑激素(Melatonin)ELISA试剂盒RJ2024248T/96T
鱼葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)ELISA试剂盒RJ2163748T/96T
小鼠血清铁(SI)ELISA试剂盒RJ1779548T/96T
人外显肽(extein)ELISA试剂盒RJ1412048T/96T
大鼠α2HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒RJ1534348T/96T
人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA试剂盒RJ1234948T/96T
人组蛋白乙酰化酶(HAT)ELISA试剂盒RJ1496848T/96T
犬Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)ELISA试剂盒RJ1955548T/96T
牛肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒RJ1939948T/96T
兔CD45分子(CD45)ELISA试剂盒RJ2092548T/96T
牛附睾分泌蛋白E1(NPC2)ELISA试剂盒RJ1902648T/96T
兔子透明质酸酶(HAase)ELISA试剂盒RJ2143348T/96T
人血管活性肽酶抑制剂(VPI)ELISA试剂盒RJ1439448T/96T
猪α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒RJ1825348T/96T
人经元细胞表达发育下调基因9(NEDD9)ELISA试剂盒RJ1286448T/96T
人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒RJ1127348T/96T
人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA试剂盒RJ1124748T/96T
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒RJ1802148T/96T
人甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒RJ1279348T/96T
豚鼠膜攻击复合物(MAC)ELISA试剂盒RJ1809348T/96T
人巨嗜细胞抑制因子-1(GDF-15;MIC-1)ELISA试剂盒RJ1288448T/96T
人多药耐药相关蛋白(MRP)ELISA试剂盒RJ1227448T/96T
大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒RJ1656348T/96T
人维生素B1(VB1)ELISA试剂盒RJ1413548T/96T
人生长激素促分泌素受体内源性配体(ghrelin)ELISA试剂盒RJ1387448T/96T
大鼠胶原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA试剂盒RJ1585748T/96T
大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒RJ1571348T/96T