【种属分类】:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
【说 明 书】:
人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒说明书随货发送或给问销售索要 。
人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒提供代测服务 (1)、原装进口抗体——高效性、灵敏性、特异性
(2)、规范包被操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
(3)、的优化方案——回收利用率高、可靠性强
(4)、适用范围——适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
(5)、可检测指标齐全——生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒说明书
注意:本试剂仅供研究使用,不能用于临床。
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠内毒素(ET)
elisa试剂盒捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的
人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒性能1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
5. 有效期:6个月
6. 检测范围:来电索取详细说明书
ELISA试剂盒样本处理方法:
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5. 植物标本的精采集及保存
1、 称取0.1g(误差±3%以内)新鲜植物组织样本,在液氮中充分研磨;
2、 加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度过夜;
3、 于4度,8000rpm,离心1小时,取上清;
4、 上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%乙mi(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干,保存备用;
5、 上样前加入pH7.4 PBS缓冲液(1ml定容)。混匀后室温放置30分钟,然后4度离心(8000rpm,15分钟),取上清并暂时保存于4度待用。
6.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
ELISA试剂盒计算解析方法例如:
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)
我司其他研发的ELISA试剂盒产品:
山羊丙二醛(MDA)ELISA试剂盒RJ2010748T/96T
鸡环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒RJ2042548T/96T
小鼠大内皮素(BigET)ELISA试剂盒RJ1703648T/96T
大鼠神经肽A(NKA)ELISA试剂盒RJ1619348T/96T
人血清低半乳糖化IgA1(UGIgA1)ELISA试剂盒RJ1448348T/96T
猪脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒RJ1880748T/96T
小鼠血小板第三因子(PF3)ELISA试剂盒RJ1780548T/96T
人甲状腺抗体(TAb)ELISA试剂盒RJ1279648T/96T
小鼠T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子3(TIM-3)ELISA试剂盒RJ1684748T/96T
人5羟吲哚乙酸(5HIAA)ELISA试剂盒RJ1115948T/96T
犬胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒RJ1989348T/96T
牛促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒RJ1899048T/96T
大鼠磷酸二酯酶4(PDE4)ELISA试剂盒RJ1597948T/96T
鹅促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒RJ2072148T/96T
牛结蛋白(Desmin)ELISA试剂盒RJ1911648T/96T
小鼠色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO)ELISA试剂盒RJ1798048T/96T
大鼠肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒RJ1620548T/96T
大鼠维生素D3(VD3)ELISA试剂盒RJ1631948T/96T
小鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒RJ1677948T/96T
鸡甘油三酯(TG)ELISA试剂盒RJ2039448T/96T
人羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMGCoA)ELISA试剂盒RJ1366948T/96T
人孕酮和adipoQ受体家族成员Ⅶ(PAQR7)ELISA试剂盒RJ1474648T/96T
兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒RJ2108548T/96T
兔精氨酸加压素(AVP)ELISA试剂盒RJ2114048T/96T
人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA试剂盒RJ1397348T/96T
大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒RJ1661848T/96T
人促肾上皮质激素释放肽(CRH)ELISA试剂盒RJ1207748T/96T
大鼠有死亡区的肿瘤坏死因子受体1相关蛋白(TRADD)ELISA试剂盒RJ1656448T/96T
兔转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒RJ2134948T/96T
人组织蛋白酶X(Cath-X)ELISA试剂盒RJ1498748T/96T
猪神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒RJ1861548T/96T
人核糖核酸抑止剂(RNH1/PRI/RNH)ELISA试剂盒RJ1259648T/96T
人解整合素样金属蛋白酶12(ADAM12)ELISA试剂盒RJ1284848T/96T
猴可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒RJ2081348T/96T
人血小板衍生生长因子AA(PDGFAA)ELISA试剂盒RJ1453248T/96T
牛尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒RJ1918548T/96T
人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA试剂盒RJ1266848T/96T
大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)ELISA试剂盒RJ1514748T/96T
人基质裂解蛋白(MAT)ELISA试剂盒RJ1273248T/96T
小鼠巨噬细胞炎性蛋白5β(MIP-5β)ELISA试剂盒RJ1730248T/96T
人可溶性核因子κB受体活化因子(sRANK)ELISA试剂盒RJ1318348T/96T