使用范围:仅供科研检测,不得用于临床.
鱼脱碘酶3(DIO3)ELISA检测试剂盒性能特点1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
5. 有效期:6个月
6. 检测范围:来电索取详细说明书
elisa试剂盒样本处理方法:
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5. 植物标本的精采集及保存
1、 称取0.1g(误差±3%以内)新鲜植物组织样本,在液氮中充分研磨;
2、 加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度过夜;
3、 于4度,8000rpm,离心1小时,取上清;
4、 上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%乙mi(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干,保存备用;
5、 上样前加入pH7.4 PBS缓冲液(1ml定容)。混匀后室温放置30分钟,然后4度离心(8000rpm,15分钟),取上清并暂时保存于4度待用。
6.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)
人肿瘤睾丸抗原(CTA)ELISA试剂盒RJ14855规格48T/96T
人促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒RJ12076规格48T/96T
鹅γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒RJ20710规格48T/96T
鱼固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)ELISA试剂盒RJ21578规格48T/96T
人cJun氨基末端激酶/应急激活的蛋白酶(JNK/SAPK)ELISA试剂盒RJ11320规格48T/96T
人内皮型一氧化氮合酶3(eNOS3)ELISA试剂盒RJ13508规格48T/96T
人叉头框蛋白01(FoxO1)ELISA试剂盒RJ11996规格48T/96T
人白细胞介素31(IL-31)ELISA试剂盒RJ11839规格48T/96T
猪总抗氧化能力(T-AOC)ELISA试剂盒RJ18833规格48T/96T
大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒RJ15569规格48T/96T
兔醛固酮(ALD)ELISA试剂盒RJ21201规格48T/96T
犬补体因子B(CFB)ELISA试剂盒RJ19636规格48T/96T
植物维生素K2(VK2)ELISA试剂盒RJ21880规格48T/96T
大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒RJ15508规格48T/96T
猪脂联素受体1(ADIPOR1)ELISA试剂盒RJ18811规格48T/96T
小鼠氢化可松(HYD)ELISA试剂盒RJ17516规格48T/96T
兔补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒RJ21010规格48T/96T
人CXC趋化因子受体7(CXCR7)ELISA试剂盒RJ11337规格48T/96T
人胞浆免疫球蛋白(CIg)ELISA试剂盒RJ11890规格48T/96T
人基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒RJ12727规格48T/96T
人钙镁ATP酶ELISA试剂盒RJ15044规格48T/96T
人尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)ELISA试剂盒RJ13542规格48T/96T
人基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA试剂盒RJ12710规格48T/96T
鹅促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒RJ20721规格48T/96T
人尿碘(Urinary iodine)ELISA试剂盒RJ13533规格48T/96T
犬催乳素(PRL)ELISA试剂盒RJ19652规格48T/96T
人链激酶(SK)ELISA试剂盒RJ13280规格48T/96T
人果糖1,6二磷酸醛缩酶(FDA)ELISA试剂盒RJ15028规格48T/96T
大鼠淋巴细胞趋化因子(XCL1)ELISA试剂盒RJ15975规格48T/96T
人抗杀菌通透性增高蛋白抗体(BPI-Ab)ELISA试剂盒RJ13044规格48T/96T
人骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒RJ12532规格48T/96T
猴子基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒RJ20864规格48T/96T
昆虫乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒RJ21971规格48T/96T
人IFN-γR1-CDw119()ELISA试剂盒RJ11425规格48T/96T
大鼠神经鞘氨醇磷酸胆碱(SPC)ELISA试剂盒RJ16189规格48T/96T
大鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒RJ15851规格48T/96T
小鼠丙二醇(SDA)ELISA试剂盒RJ16983规格48T/96T
猪补体因子B(CFB)ELISA试剂盒RJ18321规格48T/96T
人凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA试剂盒RJ13556规格48T/96T
山羊孕酮(PROG)ELISA试剂盒RJ20210规格48T/96T
绵羊乙酰辅酶A羧化酶(AACase)ELISA试剂盒RJ20054规格48T/96T
人第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒RJ12211规格48T/96T
小鼠血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒RJ17803规格48T/96T
小鼠血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)ELISA试剂盒RJ17811规格48T/96T
牛巨噬细胞来源趋化因子(MDC)ELISA试剂盒RJ19128规格48T/96T
植物三磷酸腺苷(ATP)ELISA试剂盒RJ21852规格48T/96T
大鼠胶原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA试剂盒RJ15857规格48T/96T
人乙型肝炎病毒前S2抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ14666规格48T/96T