使用范围:仅供科研检测,不得用于临床.
马胰蛋白酶(TPS)ELISA检测试剂盒性能特点1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
5. 有效期:6个月
6. 检测范围:来电索取详细说明书
elisa试剂盒样本处理方法:
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5. 植物标本的精采集及保存
1、 称取0.1g(误差±3%以内)新鲜植物组织样本,在液氮中充分研磨;
2、 加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度过夜;
3、 于4度,8000rpm,离心1小时,取上清;
4、 上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%乙mi(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干,保存备用;
5、 上样前加入pH7.4 PBS缓冲液(1ml定容)。混匀后室温放置30分钟,然后4度离心(8000rpm,15分钟),取上清并暂时保存于4度待用。
6.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)
人组蛋白去乙酰化酶(HDAC)ELISA试剂盒RJ14958规格48T/96T
小鼠乙酰胆碱转移酶(ChAT)ELISA试剂盒RJ17862规格48T/96T
人肌生成抑制素(MSTN)ELISA试剂盒RJ12693规格48T/96T
大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒RJ16111规格48T/96T
昆虫糖原磷酸化酶(GP)ELISA试剂盒RJ21973规格48T/96T
大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒RJ16563规格48T/96T
兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒RJ21443规格48T/96T
人痕量胺关联受体6(TAAR6)ELISA试剂盒RJ12624规格48T/96T
人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒RJ14514规格48T/96T
人白介素12受体亚基β1(IL12RB1/IL12R/IL12RB)ELISA试剂盒RJ11766规格48T/96T
猪干扰素α(IFNα)ELISA试剂盒RJ18406规格48T/96T
小鼠干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC;CXCL11)ELISA试剂盒RJ17125规格48T/96T
人锚蛋白(ankyrin)ELISA试剂盒RJ13411规格48T/96T
大鼠胃泌素(Gas)ELISA试剂盒RJ16333规格48T/96T
人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)ELISA试剂盒RJ12150规格48T/96T
小鼠可替宁(Cotinine)ELISA试剂盒RJ17375规格48T/96T
小鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒RJ17423规格48T/96T
牛半乳凝素1(GAL1)ELISA试剂盒RJ18954规格48T/96T
人柯萨奇B组病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ13116规格48T/96T
人幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白AIgG(HPCagAIgG)ELISA试剂盒RJ14717规格48T/96T
鸡雌激素(E)ELISA试剂盒RJ20362规格48T/96T
人胸腺依赖性抗原(TD-Ag)ELISA试剂盒RJ14385规格48T/96T
兔对氧磷酶1(PON1)ELISA试剂盒RJ21042规格48T/96T
小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3)ELISA试剂盒RJ16716规格48T/96T
人脂肪酸结合蛋白(FABPs)ELISA试剂盒RJ14814规格48T/96T
牛极低密度脂蛋白受体(VLDLR)ELISA试剂盒RJ19104规格48T/96T
人可溶性B7同源体3(sB7-H3;sCD276)ELISA试剂盒RJ13129规格48T/96T
人组蛋白赖氨酸N甲基转移酶SETD7(SETD7)ELISA试剂盒RJ14957规格48T/96T
大鼠髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒RJ16255规格48T/96T
人肝脏甘油三脂脂肪酶(HTGL)ELISA试剂盒RJ12428规格48T/96T
人1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)ELISA试剂盒RJ15013规格48T/96T
小鼠钙离子通道抗体(VGCC)ELISA试剂盒RJ17107规格48T/96T
小鼠己糖激酶2(HK2)ELISA试剂盒RJ17248规格48T/96T
牛催乳素(PRL)ELISA试剂盒RJ18995规格48T/96T
大鼠卵磷脂(Lecithin)ELISA试剂盒RJ16024规格48T/96T
人D-天冬氨酸(d-Asp)ELISA试剂盒RJ11362规格48T/96T
人磷酸苷油酸脱氢酶(GADPH)ELISA试剂盒RJ13297规格48T/96T
兔氨基端前脑钠素(NTProBNP)ELISA试剂盒RJ20970规格48T/96T
鹅催乳素(PRL)ELISA试剂盒RJ20724规格48T/96T
牛神经型一氧化氮合成酶(nNOS/NOS1)ELISA试剂盒RJ19240规格48T/96T
牛双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒RJ19252规格48T/96T
人硫酸肝素(HS)ELISA试剂盒RJ13362规格48T/96T
小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒RJ17062规格48T/96T
鱼睾酮(T)ELISA试剂盒RJ21574规格48T/96T
鸡Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒RJ20257规格48T/96T
人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒RJ14858规格48T/96T
人NOD样受体1(NOD-1)ELISA试剂盒RJ11480规格48T/96T
犬磷脂酶A2(PLA2)ELISA试剂盒RJ19753规格48T/96T
鱼羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒RJ21640规格48T/96T