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上海岑特生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒,质粒定制,各种动物血清,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,标准品对照品,培养基,抗体,细胞株,微生物,染色液溶液,实验耗材

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技术文章

血涂片制备注意事项一览

点击次数:274 发布时间:2022/7/29 13:37:13

  血涂片的制备步骤:

  (1)采血

  静脉采血后,使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血。

  (2)推片

  左手平执载玻片,或放在类似桌子等平坦地方,右手持推片从方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载玻片呈 30~45°角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片,血涂片应呈舌状,头、体、尾清晰可见。

  (3)干燥

  将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅速干燥。天气寒冷或潮湿时,应于37 ℃温箱中保温促干,以免细胞变形缩小。

  (4)标记

  在载玻片的一端用记号笔编号。

  (5)染色

  用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线,防止染液外溢。再将瑞氏染液滴在血膜上,至染液淹没全部血膜,染1分钟。加等量蒸馏水(或缓冲液)与染液混合再染5分钟。后用蒸馏水把染液冲掉,用吸水纸吸干,自然干燥后,即可观察。

  血涂片制备注意事项:

  1、要制备良好的血细胞涂片,玻片必须干净。使用玻片时,只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。

  2、好使用非抗凝血制备血涂片,也可用EDTA抗凝血制备。使用抗凝血标本时,应充分混匀后再涂片。抗凝血标本应在采集后4h内制备血涂片,时间过长可引起中性粒细胞和单核细胞的形态学改变。

  3、涂片的厚度、长度与血滴的大小、推片与载玻片之间的角度、推片时的速度等有关。一般认为血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快则血膜厚,反之则血膜薄。

  4、血膜应厚薄均匀适度,头尾及两侧有一定的空隙。如血膜面积太小,可观察的部分会受到局限,故应以在离开载玻片另一端2cm的地方结束涂抹为宜。一些体积特大的特殊细胞常在血膜的尾部出现。

  5、血涂片必须充分干燥后方可固定染色,否则细胞尚未牢固地吸附在玻片上,在染色过程中容易脱落。

原创作者:上海岑特生物科技有限公司

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