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技术文章
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒操作说明书
点击次数:783 发布时间:2017/9/30 9:22:23
古朵生物详细为您提供小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)elisa试剂盒操作说明书,价格,品牌,用途,特点等资讯,本司专业经营进口/国产ELISA试剂盒,动物血清血浆,培养基,化学试剂,标准品对照品,质粒载体,抗体,溶液,缓冲剂,多肽,酶,抗生素,细胞株,蛋白质,实验耗材,通用试剂,标准物质,其他实验试剂等,提供ELISA试剂盒免费代测服务,ELISA种属包含大鼠,小鼠,人,植物,豚鼠,马,牛,鸡,兔,猴,鸭,骆驼,猪,犬及其他动物,了解更多种属资讯请来电!
中文名:小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒
别名:小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA Kit
供应商:古朵
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
范围:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断。
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
常见ELISA试剂盒:白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。
样本类型:适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等样本。
1.免疫酶染色各种细胞内成份的定位
2.研究抗酶抗体的合成
3.显现微量的免疫沉淀反应
4.定量检测体液中抗原或抗体成份
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA检测试剂盒原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
标本的处理:
(1)细胞培养上清液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品,然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。
(2)脑脊液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品,然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。
(3)血浆
①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分钟,4℃,分离血浆样品,然后储存在零下80℃直到使用。
②用试剂盒中的标准稀释液74倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测,按照说明书指定方法检测。
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA检测试剂盒液体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5)组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒操作说明书操作流程:
1,试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
2,实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3,不用的其它试剂应包装好或盖好。
4,使用一次性的吸头以免交叉污染,避免使用带金属部分的加样器。
5,使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6,洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
8,严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为主。
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒操作说明书注意事项:
1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同,务必按照所用试剂盒严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性.
2.若不同批号ELISA试剂盒的不同组分(A液或酶工作液),或不同试剂的不同组分进行交叉使用,有可能出现显色浅或本底高,花板等情形。
3.反应时间的误差,做大量标本时,孔和*后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
4.临界值附近标本波动为正常现象,任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。
5.加样时样品量误差,对于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值附近的标本影响极大,建议校对加样器。
本司ELISA试剂盒具有以下特点:
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置。
原创作者:上海岑特生物科技有限公司