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技术文章

培养皿高压蒸汽灭菌的方法教程

点击次数:238 发布时间:2023/2/28 10:52:22

 培养皿初由在德国生物学家罗伯特·科赫手下工作的细菌学家朱利斯·理查德·佩特里于1887年设计,故又称为“佩特里皿”。培养皿质地脆弱、易碎,故在清洗及拿放时应小心谨慎、轻拿轻放。使用完毕的培养皿比较好及时清洗干净,存放在安全、固定的位置,防止损坏、摔坏。

一、培养皿如何灭菌

1、加水:将高压蒸汽灭菌锅的内层锅取出,再往外层锅中加入适量的水,比较好水位是使水的平面与锅内三角搁架相平。

2、装锅:放回内层锅,并将培养皿放入锅内。

3、加盖:将锅盖上用于排气的软管插入到内层锅的排气槽中。再以两两相对的方式同时扭紧相对应的两个螺栓,使螺栓的松紧一致,勿使漏气。

4、加热与排气:打开放气阀,然后接通电源开始进行加热,直到锅内的水沸腾并且有大量的水蒸汽从放气阀冒出时,维持3-5分钟使锅内的冷空气全部排出。等到冷空气完/全排尽以后,再将放气阀关闭,让灭菌锅内的温度随着蒸汽压力的增加而逐渐上升。

5、保温保压:当锅内压力升到所需压力值之后,控制热源,维持所需压力值直到所需时间。

6、出锅:灭菌所需的时间到后,关闭灭菌锅电源,等待锅内的温度自然下降,直到压力表的数值降到"0"之后,才可以将灭菌锅的放气阀打开,将螺栓钮松并打开灭菌锅的盖子,取出培养皿。

7、保养:灭菌完毕后,将灭菌锅内剩下的水倒出,保持锅的内壁及内胆干燥,并将灭菌锅的锅盖盖好。

二、培养皿灭菌温度与时间

高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。

三、培养皿灭菌为什么要用报纸包裹

在制作培养基时,用报纸包裹培养皿,主要是保护培养皿不受损伤,因为制作时会出现一些情况,所以要用旧报纸包裹培养皿也不会,在后加入高压蒸汽灭菌锅。 

原创作者:上海岑特生物科技有限公司

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