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技术文章
关于悬浮细胞换液需要注意的事项
点击次数:225 发布时间:2023/4/4 10:53:16
1、细胞换液是否需要用PBS清洗
我们知道,在“贴壁细胞传代”中,培养基中的血清会抑制胰酶的活性,影响消化的效果,所以必须要PBS 的清洗。但对于细胞换液,尚未查到有资料明确说明是否需要PBS清洗。我觉得这里应该根据细胞的具体情况考虑:
1.若细胞比较“娇气”或生长状态不是特别好时,建议还是不要用PBS清洗。
一方面,细胞贴壁的状态可能不是很牢固,PBS的冲洗会破坏细胞的贴壁状态;另一方面,PBS可能会洗掉细胞分泌的一些生长因子,这同样不利于细胞状态的调整。如果一定要洗,可以缓慢清洗,减少对细胞的伤害
2.当细胞生长状态不错,或者显微镜下观察细胞液中不是很干净时,可以选择用PBS清洗。
一方面可以去除积累的代谢物;另一方面,也可将一些生长状态不好或衰老的细胞洗脱下来,保持细胞活力。
2、什么是“细胞半换液”
“细胞半换液”又称“细胞半量换液”,即弃掉一半旧的培养基,再加一半新的进去。选它的原因其实与面不加PBS的理由有点相近。
其原因包括:
1.给细胞提供适应的缓冲环境;
2.细胞生长过程中可能会分泌某些生长因子,促进生长。
3.节省材料
4.方便操作:比如96孔板,换液很麻烦。所以常采用排枪进行半换液
5.对于悬浮细胞的培养,有时也会选用半换液减低细胞密度
原创作者:上海岑特生物科技有限公司