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技术文章
BI胎牛血清的保存注意事项
点击次数:707 发布时间:2020/10/20 10:40:02
胎牛血清(南美血源)的保存应该注意以下几点:
(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中,4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月,由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
(2)热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清,加热过程中须规则摇晃均匀,此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活,除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量,补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室温,待全部溶解后再分装,在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生,切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌,如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
(5)血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理, 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多,有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染,一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,geng换另一批号的血清。
(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。
BI血清的优势:
1. 血请采集后未经过陈化(Pre-Aged),充分保留大分子蛋白,指标好,内毒素低,利于细胞的生长,不会导致细胞过早的凋亡,其他重要指标都处于水平,检测方法完全符合标准或美国药典。
2. 品质有保证,BI公司三十年的血清生产经验完全符合cGMP的生产要求,并通过了ISO13485: 2003和ISO9001: 2008质量认证,符合USDA标准,并有欧洲药品监督管理局颁发的EDQM证书,可以用于制药行业。
3. 血清种类齐全,可以满足所有血清用户的需求。
4. 多种血清都提供了热灭活的包装,减少了实验室自行热灭活的工作,并限度降低了热灭活对血清的负面影响。
5. 胚胎干细胞、间充质干细胞专用血清及TET系统专用血清都经过相关实验严格筛选及验证,出售的FBS原料来源于根据世界动物卫生组织(OIE)认可的未发生疯牛病(BSE)疫情的国家,确保其质量安全。
原创作者:上海岑特生物科技有限公司