细胞培养是大多数生物实验室都会遇到的基础实验，但不是*简单的实验。细胞培养蕴含着大学问。细胞培养状态不好相信每个细胞培养者都遇到过。有时候细胞状态不好，转染 、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多，但首要因素是选好合适的细胞培养基。很多研究者只对一两种培养基比较了解，下面让我们详细介绍一下各种培养基的不同之处。

培养基

基础培养基绝大多数是建立在平衡盐溶液（BSS）基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。*广泛应用的基础培养基是MEM ，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。

目前科研市场经典的培养基有很多种，其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用*广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。

◆ MEM是由基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度。

◆ 改良的基础培养基培养基也就是我们所说的DMEM培养基*初是为小鼠成纤维细胞培养专门设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的4倍，采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。*初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了。

◆ a-MEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞。

◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM 等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。

◆ RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。

很多新人经常困惑细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单，也可以好复杂。如果这种细胞是购自细胞库，那您直接问供应商就行了，他们会给您一个*适合的推荐。如您不知道细胞的来源，您也可以找到相关的文献，基本文献中使用的培养基都可作为参考。但如果你是着手建立一种全新细胞的培养体系，根本找不到任何参考，那你就得花点时间自己试验。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做贴壁细胞培养、RPMI 1640做悬浮细胞培养会是一个好的开始。同时选购几种不同的培养基同时进行培养实验来选择其中*适合的。有时候你会惊讶地发现你的*佳培养条件与文献报道的不同，就算是同一种培养条件，细胞的生长状态也时好时坏，这是很正常的。因为试剂、水、不同批号的血清之间都存在着差异。要提高培养基的稳定性，可以从培养基和血清两方面入手。

以前大部分实验室都是用干粉培养基，但干粉有很多弊端

1. 配制过程就较为繁琐，要溶解、调pH值，过滤，过程中可能会产生一些浓度误差，

2.有些实验室的水质并不理想，所以培养的效果会有差异。

如果使用液体培养基，这种人为的误差会减少，因为毕竟是大批量工业化生产的，批间差会很小。

血清

说到细胞培养，血清固然是细胞培养中不可或缺的成分，但血清的批间差异大，更换血清时需要做大量的测试以取保替换的血清与原来的相似。而血清的供应也是必须要考虑的因素。由于气候或疯牛病等的影响，血清货源的问题对实验的影响可非同小可。另外，血清的价格也很昂贵，高品质的澳洲血清价格更高。因此，也有一些实验室开始换用无血清培养基。

无血清培养基(Serum-Free Media)，

通常以SFM表示，顾名思义，就是在细胞培养中不需要添加血清，但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等，能减少上述血清带来的不利因素，使细胞培养的条件更稳定。但它也不是完美的，从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方，对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时，也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用，因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外，它的价格也比普通的培养基贵很多。

细胞培养基应用选择

选择培养基没有固定的标准，有几点建议可供您参考：

（1） 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。

（2） 其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。

（3） 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640。

（4） 用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择*佳培养基，这是*客观的方法，但比较繁琐。

原创作者：上海岑特生物科技有限公司