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你的还原糖检测做对了吗?岑特实验√
点击次数:447 发布时间:2020/12/29 9:09:26
能够还原斐林(H.von Fehling)试剂(本尼迪特试剂)或托伦斯(B.Tollens)试剂的糖称为还原糖,所有的单糖(除二羟丙酮),不论醛糖、酮糖都是还原糖。大部分双糖也是还原糖,蔗糖例外。斐林试剂是含Cu2+络合物的溶液,被还原后得到砖红色Cu2O的沉淀。托伦斯试剂被还原后能生成单质银,发生“银镜反应”。
分子结构中含有还原性基团(如游离醛基或游离酮基)的糖,叫还原糖。如葡萄糖。
果糖含有游离的酮基,所以果糖也属于还原糖。
还原性质
般情况下,单糖的还原能力主要来自它的醛基,如葡萄糖,而多糖则大多因为半缩醛羟基的存在。还原后,自己会变成糖酸。如葡萄糖就会变成葡萄糖酸。
如该糖是酮糖,羰基就会断裂,分解成两个较小的分子,如果糖。
所有单糖(除二羟丙酮)及大部分二糖(除蔗糖等)在本尼迪克特试验中呈阳性反应,所以大部分单糖及二糖都具有还原性。
还原糖直接滴定法原理
试样经除去蛋白质后,以亚甲蓝作指示剂,在加热条件下滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(已用还原糖标准溶液标定),根据样品液消耗体积计算还原糖含量。
还原糖滴定注意事项
、碱性酒石酸甲、乙液与还原糖反应是定量关系,它们的多少直接影响测定结果的多少,从而影响检测数据,所以碱性酒石酸甲、乙液必须精-确吸取,保证每次取样量致。
影响碱性酒石酸铜甲、乙液吸取误差的因素:
1、碱性酒石酸铜甲、乙液在吸管中刻度液面的位置要保持致。
2、吸管外壁残留的液体多少会造成碱性酒石酸甲、乙液取样量的误差,所以要习惯性的对吸管外壁的碱性酒石酸甲、乙液进行相同处理,保证每次外壁残留液相对致,从而减少液体取样量的误差。
3、碱性酒石酸铜甲、乙液放入三角瓶的速度保持致(不可吹),放完后要观察其残留在吸管中有多少,要保证每次残留致。
4、碱性酒石酸铜甲、乙液的不是很明显的沉淀(或浓度变化)也会对测定造成波动,取碱性酒石酸铜甲液的器具切记不要与碱性物质接触(同时也要注意防止带入碱性物质于甲液中),以避免甲液产生沉淀,盛甲液的容器时间长了,内壁上也会残留固体(硫酸铜),这些固体颗粒也会造成检测误差。
二、滴定速度要保持均衡致,趁热以每2滴的速度滴定为好(速度不要受滴定时间的长短而改变)。
三、试样溶液滴定时要进行预测,正式测定时从滴定管滴加比预测体积少1ml的试样溶液至锥形瓶中,控制在2min中内加热至沸,保持沸腾以1滴/2s的速度滴定至终点。
四、电炉的温度对检测结果也有影响,所以要保证电炉充分预热,同时三角瓶在电炉上的放置位置要保持致。
五、测定时液体沸腾后的开始滴定的时间也要保持致2min内,般等液体充分沸腾后开始滴定。
六、滴定终点的判断也要保持致。等液体蓝色刚好褪去为为滴定终点。
七、糖液稀释及取样也要注意精-确,注意吸管正确使用方法。
八、滴定过程中-好佩戴面罩和口-罩以防沸腾液体喷溅或是发生三角爆裂等。
九、注意滴定管漏液、变形,滴定管尖端气泡等对检测数值的影响。
十、三角瓶使用后清洗干净。
十、滴定开始可以在空白三角瓶和样品三角瓶内加入几粒小颗粒玻璃珠,促进样品受热均匀以及防爆裂。
十二、如果溶液中还原糖含量较低,产生的氧化亚铜便会较少,试验后只会有绿色、混浊的黄色或橙色等。
十三、在酸性环境中,Cu2 会变得较为稳定,不容易发生反应,所以不能进行试验。
十四、醇和醛在这测试亦会产生砖红色沉淀物,因为两者都具有在这试验中产生作用的官能团。
原创作者:上海岑特生物科技有限公司