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技术文章
RNA提取时RNA降解原因
点击次数:267 发布时间:2022/3/4 11:24:31
1 ) 新鲜细胞:
裂解液的量不足,使得裂解不充分。
2 ) 新鲜组织:
某些含有内源性核酸酶的样品,很难避免RNA酶的降解,建议采用的方法为在液氮条件下将组织研碎,并且,匀浆时采用更多的裂解液。
3 ) 冷冻样品:
样品取材后应该迅速置于液氮中冷冻存放,然后转移到-70℃冰箱存放。如果未经液氮速冷直接转移到-70℃冰箱存放,会造成RNA缓慢降解。样品研磨后,在液氮刚刚挥发完时,将样品迅速转移到含裂解液的容器中,立即混匀匀浆。
4 ) 外源 RNA 酶的污染:
试剂、器械等实验用品应该采用DEPC 水灭菌处理。
5 ) 内源 RNA 酶的污染:
抑制剂失效或者用量不够,实验样品过多或者匀浆温度过高。
试剂管理窍门:一般按用途可以分为通用试剂、高纯试剂、分析试剂、仪器分析试剂、临床诊断试剂、生化试剂、无机离子显色剂试剂等。有四种常用规格:
1.优纯或一品(GR 精密分析和科学研究工作);
2.分析纯或二品(AR 重要分析和一般研究工作);
3.化学纯或三品(CP 工矿及学校一般化学实验);
4.实验试剂(L.P.)。大多数的试剂具有一定的毒性及危险性。对科研试剂的加强管理,不仅是保证分析结果质量的需要,也是确保人民生命财产安全的需要。试剂应根据毒性、易燃性、腐蚀性和潮解性等不同的特点,以不同的方式妥善管理。保存注意事项:低温、避光、干燥阴凉处封闭贮存,严禁与有毒、有害物品混放、混运。本品为非危险品,可按一般化学品运输,轻搬动轻放,防止日晒、雨淋。
我们提供的试剂产品品质优良,都是通过严格的检测体系认证。
原创作者:上海岑特生物科技有限公司