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人胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒操作说明
点击次数: 119发布时间:2011/3/7
资料简介: 产品名:人胆固醇酯转移蛋白(CETP)elisa试剂盒
英文名称:Human cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit
产品规格:48T/96T
保质期:6个月,所有试剂盒均提供*新批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
种属:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等。
ELISA试剂盒实验操作步骤包括:从包被,封闭,加样,洗涤,加显色底物,终止液加入,到读书操作,还有标准曲线制作等详尽的操作说明。
用途:用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中人胆固醇酯转移蛋白CETP的含量。
使用优点:ELISA试剂盒可特异性定量测定疾病相关蛋白,包括细胞因子、趋化因子、β淀粉样蛋白与信号转导靶标。
■灵敏,准确和一致的性能
■用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证
■在半天内可完成的现成,方便的检测
样品收集、处理及保存方法
1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在124℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
主要用于科研方面,不用于临床诊断。 可以用于检测各种指标。 购买们的 我们免费为您提供全程技术指导,解决您的后顾之忧。欢迎广大客户垂询选购!
注意事项:
◆实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
◆酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
◆建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
◆若显色过浅,可适当延长底物温育时。
◆标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
◆冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠混合,不要在混匀器上强烈震荡。
◆浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
◆反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
操作步骤:
1. 取出试剂盒,于室温(20-25℃)放置15-30分钟。实验过程应在室温(20-25℃)内进行。
2. 取出酶标板,按照标准品的次序分别加入50μl的标准品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的样品,空白对照加入50μl的蒸馏水;
4. 在样品孔中加入10μl的生物素;(不含空白对照孔,切忌:生物素只加样品孔!)
5. 在各孔中加入100μl的酶标记溶液;(不含空白对照孔)
6. 将酶标板用封口胶密封后,37℃孵育反应 1小时;(在孵育箱中保持稳定的温度与湿度)
7. 充分清洗酶标板3-5次,保持各孔有充足的水压;(浓缩洗涤液以1:100的比例与蒸馏水稀释)
8. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干;
9. 各孔加入显色剂A、B液各50μl;(不含空白对照孔)
10. 20-25℃下避光反应15分钟;
11.各孔加入50μl终止液,终止反应;
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