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造血干细胞抗原CD133抗体操作步骤
点击次数: 117发布时间:2011/3/7
资料简介: 中文名称:造血干细胞抗原CD133抗体 抗原抗体结合特点 抗原抗体反应影响因素: (二)反应环境条件
英文名称:Rabbit Anti-CD133 antibody
产品规格:0.1ml|0.2ml
宿主物种:兔
交叉反应:人,小鼠,大鼠
克隆类型:多克隆
分 子 量:95kDa
浓 度:1mg/1ml
亚 型:IgG
细胞定位:细胞膜
免 疫 原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human CD133
纯化方法:蛋白A亲和纯化
产品应用:WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:50-200 (石蜡切片需做抗原修复)
尚未测试其他应用;
实际稀释浓度可根据用户的具体用途决定。
储 存 液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
保存条件:4℃运输,-20℃保存,避免反复冻融
应用域:肿瘤 细胞生物 免疫学 干细胞
1)特异性:抗原分子只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的性能;
2)可逆性:是指Ag与相应Ab结合成IC后,在定条件下可解离为游离抗原与抗体。
3)阶段性:
阶段:特异性结合阶段 (①反应速度快,几钟或几分钟即可完成 ②不出现肉眼可见反应);
第二阶段:可见阶段(表现为凝集、沉淀、补体结合等反应 ①反应进行慢,需要几分钟、几十分钟或更长②受电解质、温度、酸碱度等多种因素影响)。
4)比例性:(适比或等价点)是指抗原与抗体发生可见反应需遵循定的量比关系,只有当二者浓度比例适当时,才出现可见反应。
()反应物自身的因素
5) 抗体:不同来源的抗体,反应性各有差异,抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应,为提高试验的可靠性,应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂.等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成,单克隆抗体不适用于沉淀反应.
6) 抗原:抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果.颗粒性抗原出现凝集反应,可溶性抗原出现沉淀反应,单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象.
7) 酸碱度:抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行.蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点.抗原抗体反应般在pH6~9进行,有补体参与的反应pH为7.7.4,pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应.
8) 温度:在定范围内,温度升高可加速分子运动,抗原与抗体碰撞机会增多,使反应加速.般为15℃~40℃,常用的抗原抗体反应温度为37℃,温度如高于56℃,可导致已结合的抗原抗体再解离,甚至变性或破坏.每种试验都有其独特的适反应温度要求.此外,适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触,加速反应.
9) 电解质:抗原与抗体发生特异性结合后,虽由亲水胶体变为疏水胶体,若溶液中无电解质参加,仍不出现可见反应.为了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液.
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